你想将一个具有KpnI末端的DNA片段克隆到一BamHI末端载体上,问题是BamHI末端和KpnI末端不匹配,BamHI切割后产
第1题
第2题
第4题
第5题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:
第6题
第7题
第8题
在开始研究遗传密码时,Crick和他的同事坚信:T4噬菌体的rⅡB蛋白的N末端对其生长不是必需的。一个理由是存在一个名为R158G的缺失突变体,其缺失从rⅡB基因的N末端到rⅡA基因的C末端,产生一个融合的rⅡA-rⅡB蛋白,该蛋白有rⅡB的功能,但没有rⅡA的功能。从遗传数据和异源双链电子显微镜图判断,这个缺失片段约900到1100核苷酸长。以下是猜测的四个精确长度:980、984、988和1088。编码rⅡA蛋白C末端和rⅡB蛋白N末端的DNA序列表明有个14核苷酸序列把两基因隔开。这些证据是使你排除一些错误的值,到底哪些是错的呢?(换一种方式提问,r1589缺失或把rⅡA和rⅡB多肽链融合在一起的任何其他缺失必须遵循什么规律?)
第10题
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端,当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构?
第11题
你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。
你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。
令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。