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[主观题]

具有EcoR Ⅱ末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoR Ⅱ末端的载体中。

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发布时间：2022-12-04

更多“具有EcoR Ⅱ末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoR Ⅱ末端的载体中。”相关的问题

第1题

具有EcoR Ⅱ末端的外源片段可以以两个方向插入到EcoR Ⅱ末端的载体中。

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第2题

pBR322可以用于黏性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接，无论用哪种方法连接，都可以用同一种酶回收外源

片段。

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第3题

Fredrick和McClarin等用一个由13个碱基对的DNA片段与EcoR Ⅰ反应，然后分离到酶和DNA共结晶的复合物，通过X射

线分析发现了什么？

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第4题

______又称______，该技术通过外源DNA与染色体DNA之间的同源重组，进行精确的定点修饰和基因改造，具有专一性

强、染色体DNA可与目的片段共同稳定遗传等特点。

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第5题

某双链DNA，以32P标记5’端，然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，得到下列长短的片段（单位为kb)，*表示带标

某双链DNA，以32P标记5’端，然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切，得到下列长短的片段(单位为kb)，*表示带标记片段。 EcoRⅠ：2．8、4．6、6．2 *、7．4、8．0 * BamHⅠ：6．0 *、10．0 *、1 3．0 如果不带标记的DNA用两种酶同时切割，会得到下列片段：1．0，2．0，2．8，3．6，6．0，6．2，7．4。两种酶的酶切图谱是什么？

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第6题

某DNA片段含有4个EcoRⅠ酶切位点：上述DNA片段存在若干突变体，这些突变体用同种酶完全

某DNA片段含有4个EcoRⅠ酶切位点：

上述DNA片段存在若干突变体，这些突变体用同种酶完全酶切，电泳后结果如图所示，其中*代表带有标记的片段。可否确定发生了何种突变？

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第7题

你正在研究一种在感染周期后期产生一套丰富蛋白质的DNA病毒。其中一种蛋白的mRNA被定位于线状基因组中部的一

个限制性片段。为确定精确位置，你将mRNA与纯化了的限制性片段退火，环境中具有DNA与RNA稳定杂交的双链，DNA两条链不能重新退火。电镜下检查退火的双链，结构如图8-3-28所示。在RNA/DNA杂合双链的末端为什么会有单链尾巴？

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第8题

人类的一段DNA片段一端为E∞R工位点，另一端为HindⅢ位点。用32P标记EcoRⅠ一端，然后用HauⅠ或Sau3A部

分酶切，进行电泳。放射自显影结果如图：

(1)EcoRⅠ到HindⅢ位点间的片段有多大？ (2)画出HhaⅠ和Sau3A的酶切位点。 (3)标记有32p的同样DNA片段，用HhaⅠ完全酶切，进行电泳，那么用EB染色或放射自显影，会分别得到什么样的图？

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第9题

一个癌基因，从序列上看似乎编码一个转录因子。当放在细胞中表达时，该基因的产物是完全不溶的，这影响了对其功

能的直接检测。免疫染色表明，这种蛋白质定位于细胞核内，如同推测的一样，是一种转录因子。如果能够测出它所结合的DNA序列，就可以从现有的序列资料中查找已知基因启动子的天然位点，从而能够找到它所调节的基因。

有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA，思路是(图Q25.8)：①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体，在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)]；②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中，转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合；③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸；④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。

图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸，N代表任何一种核苷酸；EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路，用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验，这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链，经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后，用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA，将片段克隆到质粒中，并测定了10个独立的克隆(表Q25.1)，问：

表Q25.1 10个克隆的序列

注：画线的序列是PCR引物部位，两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始，所有序列中结合位点的方向都是相同的。

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第10题

在开始研究遗传密码时，Crick和他的同事坚信：T4噬菌体的rⅡB蛋白的N末端对其生长不是必需的。一个理由是存在一

在开始研究遗传密码时，Crick和他的同事坚信：T₄噬菌体的rⅡB蛋白的N末端对其生长不是必需的。一个理由是存在一个名为R158G的缺失突变体，其缺失从rⅡB基因的N末端到rⅡA基因的C末端，产生一个融合的rⅡA-rⅡB蛋白，该蛋白有rⅡB的功能，但没有rⅡA的功能。从遗传数据和异源双链电子显微镜图判断，这个缺失片段约900到1100核苷酸长。以下是猜测的四个精确长度：980、984、988和1088。编码rⅡA蛋白C末端和rⅡB蛋白N末端的DNA序列表明有个14核苷酸序列把两基因隔开。这些证据是使你排除一些错误的值，到底哪些是错的呢？(换一种方式提问，r1589缺失或把rⅡA和rⅡB多肽链融合在一起的任何其他缺失必须遵循什么规律？)

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第11题

入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出，它们是可以互补的黏性末端，可以连接

起来，使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者)，结果如下页图所示： (1)哪个样品是环状DNA分子？ (2)线形DNA总长度是多少？ (3)环状DNA的总长度是多少？ (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱，标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。