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[判断题]

有1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂,那么酶的比活力较原来提高了100倍。()

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第1题

从一种真核细胞粗抽提物发现一种新的RNA聚合酶活性,它仅从一个单一的高度特异的启动子起始转录,当这个RNA聚
合酶被纯化以后活性降低。纯RNA聚合酶制剂完全失去酶活性,除非在反应混合物加入一些粗提物,解释这个实验结果。
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第2题

一个酶用多种方法充分纯化后被认为已经是纯的了。也就是说,在用多种溶剂进行层析,并在不同的pH值进行电泳和
在不同离子强度和成分的溶液中离心后均显示单一的峰。在用SDS-凝胶电泳分析后,得到两条带,其中一条带比另一条带宽一倍。由此可得到关于该蛋白质的什么信息?由于纯化程度总是难以证明,如何证明所作的假设是正确的?提示:用凝胶层析。
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第3题

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。

你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。

令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。

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第4题

在得到蛋白质粗提液后,欲分离到你想要的靶酶:①你将采用什么样的分离程序;②你将如何检测所获得的
靶酶已被纯化?

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第5题

在得到蛋白质粗提液后,欲分离到你想要的靶酶,a.你将采用什么样的分离程序;b.你将如何检测所获得
的靶酶已被纯化?

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第6题

木瓜酶由未成熟的木瓜果实经()、()、()、()制成粗品酶制剂。

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第7题

假定你已分离到一种蛋白质,好像具有两种酶活性。这使你怀疑纯化时可能同时得到了两种蛋白质。为了验证这点,你
将该蛋白质制品在不同pH下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。在每种凝胶中,都得到一条带,但带很宽,有可能包含两种未分离开的蛋白质。在SDS-凝胶中,也发现一条很宽的带,因为有两种酶活性的蛋白质很少见,有必要更仔细验证一下较宽的带是否存在两组组分。在电泳时你能改变什么条件来提高分辨力?除电泳外还可用其他什么方法检测?
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第8题

分离纯化蛋白质的主要方法有( )。

A.分光光度法

B.分子筛层析法

C.双缩脲法

D.离心法

E.电泳

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第9题

在纯化一种蛋白质并研究其性质的实验过程中,你遇到了一些问题,请利用你所掌握的知识解决这些问题:①实验开始
阶段,你已经获得大量可高效表达此蛋白质的细菌菌体,请写出两种破碎菌体的方法;②通过粗纯化,你得到100毫升样品,你计划用离子交换层析法纯化这些样品,已知该蛋白质的等电点为5.0,你所用的缓冲液的pH为7.5,为了使该蛋白质能与离子交换剂结合,你应使用阴离子交换剂还是阳离子交换剂?③得到纯化好的蛋白质样品后,你需要检验该样品的纯度并确定其分子量,简述如何进行实验;④接下来,你计划研究该蛋白质的变性与复性特性,你发现蛋白质样品浓度较低,不能满足实验要求,请写出两种可用于提高蛋白质浓度的方法;⑤在实验中,你发现只有在复性缓冲液中添加还原剂时,该蛋白质才能正常复性,恢复其天然构象与生物功能,请简要解释原因。
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第10题

优势育种则先使亲本纯化成为自交系,然后使纯化的自交系杂交获得杂种F1用于生产,先杂后纯。()

优势育种则先使亲本纯化成为自交系,然后使纯化的自交系杂交获得杂种F1用于生产,先杂后纯。()

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第11题

试说明从闪锌矿出发,炼得粗锌以及最后得到纯锌的炼锌过程。

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