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[主观题]

在得到蛋白质粗提液后，欲分离到你想要的靶酶，a．你将采用什么样的分离程序；b．你将如何检测所获得

的靶酶已被纯化？

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发布时间：2022-12-04

更多“在得到蛋白质粗提液后，欲分离到你想要的靶酶，a．你将采用什么样的分离程序；b．你将如何检测所获得”相关的问题

第1题

假定已分离到一种大肠杆菌的温度敏感突变株。在42℃条件下其蛋白质合成有缺陷。把30℃条件下生长的培养物加温到

42℃，同时加入¹⁴C-亮氨酸。10分钟后，在42℃条件下加入三氯乙酸，并分离和检测酸不溶性物质，发现都是含放射性的。如果不是那样，而是把细胞破碎，通过离心分级细胞抽提液，发现全部¹⁴C都在含核糖体的部分，在这种情况下没有游离的¹⁴C标记的蛋白质。试问哪一个步骤可能是温度敏感的？

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第2题

天然存在的氨基酸一般为_________型氨基酸，可以从蛋白质水解液中分离得到。

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第3题

20世纪60年代中期有一项杰出的实验：把ФX174DNA、4种脱氧核苷三磷酸、高纯度聚合酶Ⅰ和煮沸过且不含蛋白质的细

胞抽提液混合在一起，单链环状的ФX174噬菌体DNA分子在离体条件下酶促转变为双链共价环。如果将这种抽提液透析后，聚合作用就不能发生。试问在抽提液中含有什么物质？

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第4题

在正相液固色谱柱上，欲分离某极性化合物，下列溶剂使其保留时间最短的是（)。

A.乙醚

B.苯

C.甲醇

D.乙酸乙酯

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第5题

在纯化一种蛋白质并研究其性质的实验过程中，你遇到了一些问题，请利用你所掌握的知识解决这些问题：①实验开始

阶段，你已经获得大量可高效表达此蛋白质的细菌菌体，请写出两种破碎菌体的方法；②通过粗纯化，你得到100毫升样品，你计划用离子交换层析法纯化这些样品，已知该蛋白质的等电点为5.0，你所用的缓冲液的pH为7.5，为了使该蛋白质能与离子交换剂结合，你应使用阴离子交换剂还是阳离子交换剂？③得到纯化好的蛋白质样品后，你需要检验该样品的纯度并确定其分子量，简述如何进行实验；④接下来，你计划研究该蛋白质的变性与复性特性，你发现蛋白质样品浓度较低，不能满足实验要求，请写出两种可用于提高蛋白质浓度的方法；⑤在实验中，你发现只有在复性缓冲液中添加还原剂时，该蛋白质才能正常复性，恢复其天然构象与生物功能，请简要解释原因。

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第6题

酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用具有如下哪些主要特点和优势( )

A.敏感性高

B.能真实反应细胞内蛋白质间相互作用情况

C.使蛋白质表现型和基因型相联系

D.不需分离靶蛋白

E.可以筛选cDNA文库

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第7题

有一些蛋白质在初合成时没有生物学活性，被分泌并运输到靶器官后，经______成为具有生物学活性的蛋白质。

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第8题

提取分离蛋白质和酶用A.酸水提取液通过阳离子交换树脂B.水煮液通过阴离子交换树脂C.水煮乙醇分级

提取分离蛋白质和酶用

A.酸水提取液通过阳离子交换树脂

B.水煮液通过阴离子交换树脂

C.水煮乙醇分级沉淀

D.水冷浸液无机盐分级沉淀

E.水煮液醇沉后溶液通过离子交换树脂

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第9题

蛋白质在膜性囊泡内沿细胞运输，这些囊泡：

A.在部分膜突起和出芽时产生。

B.在囊泡内部有一层被膜蛋白。

C.利用蛋白质外被来寻找靶膜。

D.抵达靶目标后去掉被膜。

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第10题

欲在细菌中表达一稀有蛋白质，以便能够大量制备这种蛋白质。为确保分离纯化，计划将6个组氨酸的短肽

加到蛋白质的N端或C端，这样蛋白质能紧密结合到Ni2+柱上，在EDTA或溶液洗脱时又能被洗脱下来。蛋白质的对应核苷酸序列如下，试设计一对PCR引物能扩增基因的编码区，并在N端加入一个后接6个His密码子的起始密码子或在C端加入6个His密码子后接一个终止子。 N端 5-GGT CGT ATG GCT AC7、CGT CGC GCT GC2——————CTT GCT GCA AGT CTC TCT、TAG AAG TGT-3 C端

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第11题

常采用虹吸法吸取上清液。适用于固体物含量高的料液的粗分离A.沉降分离B.离心分离C.常压滤过D.减

常采用虹吸法吸取上清液。适用于固体物含量高的料液的粗分离

A.沉降分离

B.离心分离

C.常压滤过

D.减压滤过

E.加压滤过

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