第1题
由酵母交配型基因座产生的关键调控蛋白之一是一个抑制蛋白,称做α2。在可交配型的单倍体细胞中,α2对于关闭一系列涉及到交配型特异性的基因是必需的。在α2二倍体细胞中,α2抑制物同α1基因产物协同作用,关闭了除α特异性基因外的一系列单倍体特异性的基因。两类有区别又相互关联的保守DNA序列在这两套控制基因的上游被发现,一个在单倍体特异性基因前,另一个在α特异性基因前。根据这些上游序列的相关性,很有可能α2与两者都结合。然而,它的结合特性在它能识别单倍体特异性基因前必须通过α1蛋白以某种方式进行修饰。至此,这种修饰作用的本质是什么?α1是能催化α2的共价修饰,还是能与α2结合而修饰α2蛋白?
为了认清这些问题,要做三个实验。首先,在单独作用和共同作用两种方式下,测定α1和α2与两种上游调控DNA位点的结合(图13-3-50所示)。α1单独不能同含有任何调控位点的DNA片段结合。然而α2虽能与α专一性片段结合,但是不能同单倍体专一性片段结合。α1和α2的混合物同两者都能结合。
在第二个实验中,大量的含α专一性序列的未标记DNA加入到α1和α2蛋白的混合物中。在这样的条件下,单倍体专一性片段仍被束缚。同样,如果加入过量的含有单倍体专一性片段的未标记DNA到混合物中,α专一性片段仍然被束缚。
在第三个实验中,改变不同的α1和α2的比例,当α2过量时,同单倍体专一性片段的结合减弱,而当α1过量时,同α专一性片段的结合减弱。
第4题
A.α2蛋白与PRTF相互作用抑制α-特异性基因。
B.α1蛋白与PRTF相互作用抑制α-特异性基因。
C.α2蛋白与α1蛋白相互作用抑制单倍体特异性基因。
D.α2蛋白根据其相互作用对象与同种DNA序列(不同种)结合。
第5题
噬菌体T4编码一个对重组和DNA复制很重要的单链DNA结合蛋白(SSB蛋白)。含有编码SSB蛋白温度敏感型基因的噬菌体T4突变体在升高温度时会快速地终止重组和DNA复制。噬菌体T4 SSB蛋白是分子质量为35 000Da的单体蛋白,它和单链而不是双链DNA紧密结合,结合体中DNA与蛋白质的重量比为1:12。然而SSB蛋白和DNA的结合显示出一个很特别的性质,如图Q13.4所示。当单链DNA过量时(10μg),而SSB蛋白为0.5μg时则完全检测不到结合体[图Q13.4(a)],然而当SSB蛋白为7.0μg时,可以看见许多二者的结合体[图Q13.4(b)]。
图Q13.4噬菌体T4 SSB蛋白与单链DNA的结合通过蔗糖梯度离心分析,发现DNA较蛋白质重得多,沉得快,因此更靠近梯度的底部
第7题
在细菌中,()蛋白与DNA单链结合,并使该DNA与变性的互补DNA配对。
A.RecA
B.RecBCD
C.UvrABC
D.UvrD
E.DnaB
第8题
第10题
(a)体外。DNA合成反应中加入单链结合蛋白(SSB)通常会增加DNA的产量,解释原因。(b)合成反应一般在体外65℃条件下进行,通常采用生长在高温环境中的细菌中分离出的DNA多聚酶,这有何好处?
第11题
A.原点是一段含多个短重复序列的独特的DNA片段。
B.原点是形成稳定二级结构的回文序列。
C.DNA结合蛋白多聚体特异性识别这些短重复序列。
D.原点旁序列的A·T对很丰富,利于DNA双螺旋解链。
E.原点侧旁序列的G·C对很丰富,可稳定起始复合物。