已发现大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的3'→5'的外切酶活性并不能区分3'端错误配对的核苷酸和正确配对的核

苷酸。3'-端正确配对的核苷酸和错误配对的核苷酸可被相同的速度切下。你如何解释这种观察到的结果与3'→5'的外切酶活性提高复制的忠实性这一事实不相冲突。

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发布时间：2022-12-04

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第1题

除了聚合作用外，DNA聚合酶Ⅰ还具有3'→5'校正核酸外切酶的活性，在把错配碱基从新合成DNA链末端切去的

校正过程中发挥作用。为了鉴定这种活性，你制备了人工合成的poly(A)链和poly(T)链作为底物，其中poly(T)链上含一段³²P标记的dT残基，同时其3'端还连了几个³H标记的dC残基，如图Q2.3所示。分别统计：在没有任何dTTP存在，DNA不可能合成以及有dTTP存在，DNA可以合成的两种情况下，标记dT和dC残基的丢失，结果如图Q2.4所示。

图Q2.3研究大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ校正功能的人工底物黑体字母表示被放射性标记的核苷酸

图Q2.4 DNA聚合酶Ⅰ在不含dTTP(a)和含有dTTP(b)时的校正功能

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第2题

假定你正在研究一种类似于大肠杆菌聚合酶Ⅰ的DNA聚合酶。这种酶像聚合酶Ⅰ一样，具有聚合酶活性和5'→3'

核酸外切酶活性。它还具有其他活性，但是你还不知道。当这个酶与含单链切口(具游离3'-OH基团和游离5'-P基团)的双链DNA模板分子以及4种放射性标记脱氧核糖核苷-5'-三磷酸一起放置时检出了放射性DNA(这意味着生成了酸不溶性的放射性物质)。因为核苷酸在酸中是可溶性的，而DNA不溶解于酸中，所以这用来表征DNA的合成。在合成20%以后(也就是所合成的酸不溶性放射性等于模板DNA重量的20%)，模板DNA分子的分子量没有增加，而且在CsCl密度中仍然保持着双链DNA的密度。如果用突变体的聚合酶，它的聚合酶活性正常，但缺少核酸外切酶活性，合成20%以后，模板DNA的分子量增加，而且放射性物质的密度大于双链DNA的密度(但没有达到单链DNA的密度)。

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第3题

纠正下列一段话中的错误：在大肠杆菌中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dN

纠正下列一段话中的错误：

在大肠杆菌中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dNTP同δ亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第一个dNTP形成2'→5'磷酸二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时，β'亚基脱离DNA聚合酶，RNA链在全酶的作用下继续延伸。当DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时，转录作用停止。

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第4题

如果将纯化的大肠杆菌RNA聚合酶全酶（全酶中包含有δ亚基)在四种必需的核苷三磷酸存在的条件下加入到DNA，就合

如果将纯化的大肠杆菌RNA聚合酶全酶(全酶中包含有δ亚基)在四种必需的核苷三磷酸存在的条件下加入到DNA，就合成RNA。对所得到的RNA进行长度分析，表明mRNA分子的长度分布范围很广，且长度的分布是连续的。如果加入少量的细胞抽提液(已证实不含有核酸酶)，则观察到长度不连续的较小的片段，试问抽提液中存在什么？

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第5题

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的大片段称为______片段，它是基因工程中常用的工具酶。

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第6题

DNA聚合酶Ⅰ具有5'→3'聚合酶活性，3'→5'和5'→3'______。

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第7题

DNA复制需要：（1)DNA聚合酶Ⅲ;（2)解链蛋白;（3)DNA聚合酶Ⅰ;（4)DNA指导的RNA聚合酶;（5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是：（)

A. (4)(3)(1)(2)(5)

B. (2) (4) (1) (3) (5)

C. (2)(3)(4)(1)(5)