第2题
当处理过的细胞分化时,大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维),肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立,一个独立的主调控基因,它正常情况下由于甲基化受到抑制,它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态,而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的,在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针:
探针1:从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA,制备含放射性的cDNA探针。
探针2:用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
探针3:从正常的肌原细胞中分离RNA,制备放射性DNA探针,然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交,但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之,有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。
表13-3-54 | |||
Class | Probe 1 | Probe 2 | Probe 3 |
A B C D | + + + + | — — + + | — + — + |
第3题
第5题
第6题
A.受检者血白细胞的分离
B.白细胞DNA的制备
C.配制PCR反应体系
D.PCR反应及其产物的琼脂糖电泳
E.反应产物的SSCP分析
第8题
用EDTA和EGTA为配体,可以制备什么范围的Ca2+缓冲溶液?今欲制备Ca2+总浓度为100μmoI·L-1,游离[Ca2+]=1.0μmol·L-1,pH=7.0的溶液100mL,问如何用储备液([Ca2+]=[EDTA]=[EGTA]=1.0mmol·L-1;pH=7.0的10×缓冲溶液)配制?已知:pH=7.0下,lgK's(Ca-EDTA)=7.60,lgK's(Ca-EGTA)=6.47。
第9题
用14N标记的生物A的DNA与等浓度的用15N标记的生物JDNA杂交,再在CsCl中离心至平衡。复性DNA总量的5%具杂种密度。以上两种生物的共同碱基顺序的比例是多少?
第10题
制备闭合环状和双螺旋DNA分子,其中一条链含15N和13C(“重链”),另一条链含14N和12C(“轻链”)。如用下述方法对DNA进行处理,再在中性pH条件下进行CsCl密度平衡离心,试问两条链将如何分布?
A.置于碱溶液(pH13)或在水中煮沸。
B.用足量的核酸内切酶处理,使每条链出现2~3个切口。
C.同B,但接着置于碱溶液或在水中煮沸。
第11题
A、单糖浆的浓度为85%(g/g)
B、热溶法制备糖浆剂适合于对热稳定的药物
C、单糖浆可作为矫味剂、助悬剂
D、糖浆剂本身具有抑菌作用,不需加防腐剂
E、制备糖浆剂宜用蒸气夹层锅加热,并应严格控制温度与时间