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题目内容（请给出正确答案）

[多选题]

下列可分离纯化活性蛋白质的方法有

A.透析法

B.超速离心法

C.凝胶过滤法

D.盐析法

E.水与三氯甲烷萃取

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发布时间：2022-12-04

更多“下列可分离纯化活性蛋白质的方法有 A．透析法 B．超速离心法 C．凝胶过滤法 D．盐析法 E．水与三氯甲烷萃取”相关的问题

第1题

蛋白质合成的整体准确性是很难衡量的，一方面，因为极端的准确和错误都是罕见的，而且细胞似乎能够很快消灭它

们的错误；另一方面，技术上也有困难。比如能够确切鉴定一种蛋白质到哪种程度，从概念上说，这与知道如何提纯、鉴定是两码事。解决这个问题的一个聪明的方法是利用细菌鞭毛虫惟一蛋白：鞭毛蛋白(相对分子质量为40000)。鞭毛蛋白有两个优点：首先，鞭毛(即鞭毛蛋白)能被从细菌上切下并用差速离心纯化，另外，鞭毛蛋白中不含Cys，因此允许利用Cys错误加入肽链进行灵敏的检测。为了放射性标记Cys，细菌在含³⁵

(放射活性为5.0×10³cpm/pmol)和过量的未标记Met的生长培养基中恰好生长一个世代(这种情况下无可测出的放射性进入Met)，把所得的鞭毛蛋白纯化并进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，发现从凝胶上回收的8μg鞭毛蛋白中含有³⁵S带来的放射性为300cpm。请问：

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第2题

适用于蛋白质的分离纯化，但不至于使其变性的方法为A.醇提水沉法B.盐析法C.酸碱法D.水提醇沉法E.

适用于蛋白质的分离纯化，但不至于使其变性的方法为

A.醇提水沉法

B.盐析法

C.酸碱法

D.水提醇沉法

E.离心分离法

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第3题

某研究小组正在研究单细胞纤毛虫——四膜虫的蛋白质合成，并获得有关四膜虫的一种蛋白质c端氨基酸和核苷酸部分

序列：

I M Y K Q V A Q T Q L *

AUU AUG UAU AAG UAG GUC GCA UAA ACA CAA UUA UGA GAC UUA

实验中遇到了一些困难，主要是不能利用网织红细胞(一种体外分析蛋白质合成的标准系统)的裂解产物来翻译经纯化的四膜虫mRNA。尽管mRNA的质量很好，但翻译产物却都是小分子多肽(图Q11.1，泳道1)。为了找出不能正确翻译蛋白质产物的原因，用来自烟草花叶病毒(TMV)编码的一个分子质量为116kDa的蛋白质的纯化mRNA进行了一系列对照实验。在体外系统中，TMV mRNA可被很好地翻译，在116kDa处显现一主带和一个极弱的约50kDa的小带(图Q11.1，泳道2)。加入四膜虫RNA后，较大分子质量的产物有显著增加(图Q11.1，泳道3)。加入一些四膜虫的细胞浆(去除了核糖体)，TMV mRNA几乎专一地产生分子质量较大的产物(图Q11.1，泳道4)。令人高兴的是先前无活性的四膜虫mRNA现在似乎可以被翻译了(图Q11.1，泳道4)。去除TMV mRNA后，这种推测得到证实(图Q11.1，泳道5)。

图Q11.1在来自四膜虫的各种成分加入或缺省时TMV mRNA的翻译

请问：

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第4题

蛋白质X的分子量为140 000，等电点为pH 5．4；蛋白质Y的分子量为150 000，等电点为pH8．6，我们选取哪

种方法将它们分离？()

A．分子筛

B．半透膜渗透

C．离子交换色谱

D．硫酸铵分级沉淀

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第5题

酶的纯化方法有______。

A.除杂质

B.脱盐

C.浓缩

D.结晶

E.活力测定

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第6题

蛋白质X的相对分子质量为140 000，等电点为pH5．4，蛋白质Y的相对分子质量为150 000，等电点为pH8，我

们选取哪种方法将它们分离？()

A．分子筛

B．半透膜渗透

C．离子交换色谱

D．硫酸铵分级沉淀

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第7题

在纯化一种蛋白质并研究其性质的实验过程中，你遇到了一些问题，请利用你所掌握的知识解决这些问题：①实验开始

阶段，你已经获得大量可高效表达此蛋白质的细菌菌体，请写出两种破碎菌体的方法；②通过粗纯化，你得到100毫升样品，你计划用离子交换层析法纯化这些样品，已知该蛋白质的等电点为5.0，你所用的缓冲液的pH为7.5，为了使该蛋白质能与离子交换剂结合，你应使用阴离子交换剂还是阳离子交换剂？③得到纯化好的蛋白质样品后，你需要检验该样品的纯度并确定其分子量，简述如何进行实验；④接下来，你计划研究该蛋白质的变性与复性特性，你发现蛋白质样品浓度较低，不能满足实验要求，请写出两种可用于提高蛋白质浓度的方法；⑤在实验中，你发现只有在复性缓冲液中添加还原剂时，该蛋白质才能正常复性，恢复其天然构象与生物功能，请简要解释原因。

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第8题

蛋白质分离纯化的条件不包括( )

A.缓冲液

B.盐、金属离子和螯合剂

C.还原剂

D.氧化剂

E.去垢剂

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第9题

假定你已分离到一种蛋白质，好像具有两种酶活性。这使你怀疑纯化时可能同时得到了两种蛋白质。为了验证这点，你

将该蛋白质制品在不同pH下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。在每种凝胶中，都得到一条带，但带很宽，有可能包含两种未分离开的蛋白质。在SDS-凝胶中，也发现一条很宽的带，因为有两种酶活性的蛋白质很少见，有必要更仔细验证一下较宽的带是否存在两组组分。在电泳时你能改变什么条件来提高分辨力？除电泳外还可用其他什么方法检测？

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第10题

关于老年人药物代谢的特点，下列那项叙述错误（)。

A.肝脏药物代谢酶活性增高

B.肝细胞、肝血流量下降

C.肝脏合成蛋白质的能力降低

D.血浆半衰期延长

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第11题

一个酶用多种方法充分纯化后被认为已经是纯的了。也就是说，在用多种溶剂进行层析，并在不同的pH值进行电泳和

在不同离子强度和成分的溶液中离心后均显示单一的峰。在用SDS-凝胶电泳分析后，得到两条带，其中一条带比另一条带宽一倍。由此可得到关于该蛋白质的什么信息？由于纯化程度总是难以证明，如何证明所作的假设是正确的？提示：用凝胶层析。

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