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[主观题]

某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:

EcoRⅠ、BglⅡ、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ。如果DNA克隆到EcoRⅠ位点,两种基因抗性都不受影响;DNA克隆到.BglⅡ、HindⅢ或SalⅠ位点,会破坏四环素抗性;DNA克隆到PstⅠ位点,会破坏氨苄青霉素抗性。用限制酶完全切割该质粒,得到以下结果:

某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:Ec(1)画出该质粒的酶切图谱,标明抗性基因的位置和酶切位点。 (2)如用HindⅢ切割未标记的上述DNA片段,得到5.5 kb和2.5 kb两段。如果在EcoRⅠ的3.5 kb酶切片段上没有HindⅢ切点,则用双酶(EcoRⅠ+HindⅢ)切割后会得到什么样的片段?

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更多“某种长3 kb的质粒带有一个氨苄青霉素抗性基因和一个四环素抗性基因,该质粒含有下列酶的单一位点:”相关的问题

第1题

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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第2题

质粒pBR607DNA是双链环状的,分子量为2×106U。这个质粒带有两个基因,它们所编码的蛋白质产物使宿主细菌对四环

质粒pBR607DNA是双链环状的,分子量为2×106U。这个质粒带有两个基因,它们所编码的蛋白质产物使宿主细菌对四环素和氨苄青霉素具有抗性(Tet-r和Amp-r)。该DNA对下列限制酶只有一个识别部位:EcoRI、BamHI、HindⅢ、PstI和SaII。将DNA克隆到EcoRI部位并不影响对两种药物的抗性。将DNA克隆到BamHI、HindⅢ和SaII部位则破坏四环素抗性。克隆到PstI部位破坏氨苄青霉素抗性。用下列限制酶混合物消化可得到如表16-2-10所列的片段。试在限制酶图上标出相对于EcoRI切点的PstI、BamHl、HindⅢ和SalI的切点。

表16-2-10

酶混合物片段分子量(×106U)
EcoRI,PstI

EcoRl,BamHI

EcoRI,HindⅢ

EcoRI,SalI

EcoRI,BamHI,PstI

0.64.2.14

0.2.2.4

0.05.2.55

0.55.2.05

0.2.0.64.1.94

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第3题

黏性质粒是由______与______重新构建的载体,其克隆容量可达______kb。
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第4题

你试图描述一个特殊基因的特征,最后你成功地获得了产生可供选择的细菌突变株,但为了鉴别该基因,你不得不通过下列什么方法来证明分离的基因单独对观察到的突变株表型起作用?

A.把诱变剂加入细菌培养基中,分离与其野生型表型对应的回复突变株。

B.不能得到反式互补,因在带有突变基因的质粒对突变菌株的转化中,将不贮存野生型。

C.不能获得反式互补,因通过带有突变基因的质粒来进行野生型的转化,将不会产生突变株。

D.有反式互补,因通过带有突变基因的质粒进行突变型细菌的转化能产生野生型表型。

E.获得反式互补,因通过带有野生型基因的质粒进行突变型细菌的转化能贮存野生型表型。

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第5题

从E.coli中分离到一种hemA突变体,这种突变是不可恢复的,并且需要生长在琥珀酸的平板上才能利用δ-氨基乙酰丙
酸合成血红素。希望利用该突变体去克隆E.coli的hemA基因。首先用Sau3A Ⅰ部分酶切E.coli的DNA,得到的DNA片段平均为2kb,然后将这些片段从BamH Ⅰ位点克隆到质粒pBR322中,连接后转化hemA突变体。根据氨苄青霉素抗性来选择重组体。将筛选到的氨苄青霉素抗性克隆重植在加有δ-氨基乙酰丙酸的平板上进行测试。请问:已经测试的Ampr抗性转化子中有多少不再需要在培养基中添加琥珀酸?(E.coli基因组的全长为4500kb。)
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第6题

克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的______的使用,它们主要是从原核细胞中分离的。______能够将DNA切割成
特定大小的片段。各种各样的DNA聚合酶也是克隆所必需的,包括将RNA转录出单链DNA的______。DNA______用于连接限制性片段。克隆也需要来源于微生物的DNA序列,包括用来运载被______克隆载体。质粒载体来源于天然细菌质粒,通常携带有______抗性基因。其他载体来源于噬菌体,如λ噬菌体,它们经过修饰后可以运输外源DNA。要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的______。人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。例如,极微量的DNA片段可以通过______得到扩增。在感兴趣基因的启动子上连接,如______或______之类的______基因能够定量检测基因的活性。
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第7题

若菜单选项的名字前带有对勾“√”记号,这种选项表示___。

A.该选项有下级子菜单

B.当前不能选取

C.选中这种选项,会弹出一个对话框,要求用户输入某种信息或某些设置

D.这种选项正处于有效状态

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第8题

如果细菌的某种表型特征在uv处理下丧失后不再恢复,这种表型有可能是质粒赋予的。
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第9题

微细胞是一种大肠杆菌突变体,( )。

A.它不带任何DNA

B. 它的体积为正常细胞的1/10

C. 它带有染色体DNA,但不能表达

D. 它带有质粒DNA,可以表达

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第10题

通过什么方法证明分离的基因单株对突变体表型起作用?( )

A.把诱变剂加入细菌培养基中,分离与其野生型对应的恢复突变株

B.不能得到反式互补,因在带有突变基因的质粒对突变型菌株的转化中,不储存野生型

C.不能获得反式互补,因通过带有突变基因的质粒来进行野生型转化,不会产生突变株

D.获得反式互补,因通过带有野生型基因的质粒来进行突变型细菌转化,能储存野生型表型

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第11题

基因工程操作应用的许多载体质粒都有抗生素的抗性基因,这是为了便于

A、外源基因插入质粒

B、宿主菌的生物繁殖

C、质粒的转化

D、带有目的基因的宿主菌的筛选

E、目的基因的表达

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