当过量的RNA与限量的DNA杂交时:
A.所有的RNA均杂交。
B.所有的DNA均杂交。
C.50%的RNA杂交。
D.50%DNA杂交。
E.没有RNA被杂交,而且所有的DNA重新联合为双链DNA。
A.所有的RNA均杂交。
B.所有的DNA均杂交。
C.50%的RNA杂交。
D.50%DNA杂交。
E.没有RNA被杂交,而且所有的DNA重新联合为双链DNA。
第1题
A.大量未标记的RNA与限量的基因组DNA杂交。
B.少量标记的RNA与过量的基因组DNA杂交。
C.过量的DNA足够使所有被标记的RNA被杂交。
D.跟踪者RNA与转录得到它的DNA簇重新结合。
E.大多数的追踪RNA与中等重复序列杂交。
第2题
当处理过的细胞分化时,大约25%的细胞转变为肌肉细胞(肌原纤维),肌原细胞形成的高频率导致一种假说的建立,一个独立的主调控基因,它正常情况下由于甲基化受到抑制,它可以启动完整的转化。估计这个基因在用5'-氮化胞苷处理前是处于关闭状态,而在诱导的肌原细胞中呈开放状态。如果这个设想是真的,在用5'-氮化胞苷处理后的mRNA的cDNA拷贝中应能找到与这个用5'-AzaC处理后就开始启动的基因有关的序列。对策是应用一套放射性探针从正常肌原细胞(这种细胞按照你的设想也能表达这个基因)获得的cDNA文库中挑选可能的cDNA克隆。应准备三种放射性探针:
探针1:从5'-氮化胞苷诱导的肌原细胞中分离RNA,制备含放射性的cDNA探针。
探针2:用5'-AzaC处理的肌原细胞中的有放射性的cDNA与未经处理的10T1/2细胞中的RNA进行杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
探针3:从正常的肌原细胞中分离RNA,制备放射性DNA探针,然后与未经处理的10T1/2细胞中的RNA杂交,除去所有的RNA和DNA杂合体。
第一个探针同cDNA文库中的大多数克隆发生了杂交,但是这些克隆中只有约1%的克隆与探针2或探针3进行杂交。总之,有四种独特的杂交模式(表13-3-54)。
表13-3-54 | |||
Class | Probe 1 | Probe 2 | Probe 3 |
A B C D | + + + + | — — + + | — + — + |
第5题
爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且呈单链形式结合在滤膜上的DNA进行杂交。该RNA:DNA杂交分子与原肠胚期爪蟾胚胎的非标记细胞质总RNA相竞争。图13-3-68A是假设的结果。在另一相应但相反的实验中,放射性原肠胚期细胞质RNA(原肠胚期胚胎用3H-尿苷标记)与滤膜上的总DNA杂交,该RNA:DNA杂交分子与非标记的后期卵细胞质RNA相竞争,结果如图13-3-68B。
第6题
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
第7题
A.在260nm波长处的吸光度增加
B.多核苷酸链断裂成寡核苷酸链
C.碱基对形成的氢键断裂
D.加入互补RNA链经缓慢冷却后可形成DNA/RNA杂交分子
E.溶液黏度增加
第10题