细胞内重要的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶包括:受环核苷酸调控的______和______、受DAG/Ca2+调控的______、受Ca2+/C
细胞内重要的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶包括:受环核苷酸调控的______和______、受DAG/Ca2+调控的______、受Ca2+/CaM调控的______、受PIP3调控的______、受细胞周期蛋白调控的______以及______。
细胞内重要的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶包括:受环核苷酸调控的______和______、受DAG/Ca2+调控的______、受Ca2+/CaM调控的______、受PIP3调控的______、受细胞周期蛋白调控的______以及______。
第7题
为了检查Raf-1的作用,按照方案设想,改变了ATP结合区的一个关键氨基酸残基,构建一个显性负作用的raf-cDNA。这种突变的cDNA编码一个有缺陷的激酶蛋白质,命名为NAF(没有功能的Raf)。从raf-1 cDNA和NAF的cDNA制备了RNA,并将它们单独地或混合地注射到2细胞蛙胚胎中,以确定它们对蛙发育的影响。实验结果列于表025.3中。在某些注射体中,短尾的表型非常明显。
第8题
A.生长因子,如PDGF等
B.生长因子受体,如c-src等
C.细胞内信号转导体,如丝氨酸/苏氨酸激酶等
D.核内转录因子,如myc等表达的蛋白质
E.含稀有碱基的核酸
第9题
A.受其作用的酶蛋白酪氨酸残基磷酸化
B.蛋白质丝氨酸残基磷酸化
C.蛋白质苏氨酸残基磷酸化
D.组蛋白磷酸化
E.任意氨基酸残基的磷酸化
第10题
选择出不含LexA-Ras质粒,仅含VP16-cDNA质粒的“痊愈”细胞,这些细胞可用在缺乏组氨酸的平板上检查是否生长和在有XGAL存在时的显色情况而被挑选出来。那些不能在组氨酸平板上生长和有XGAL存在时形成白色菌落的“痊愈”细胞用LexA-核纤层蛋白质粒转化,并再次在上述平板上测试生长,只有那些在缺乏His的平板上不生长且形成白色菌落(含XGAL)的含LexA-核纤溶蛋白基因质粒的细胞可用于进一步分析。
在1.4×106个原始转化体中仅有19个菌落满足详细分析的严格标准。再测定每种细胞中插入到VP16基因片段的下游的cDNA序列时,将发现:9个菌落(克隆)均有插入的cDNA,均与Raf丝氨酸/苏氨酸激酶的N末端相对应,6个与C-Raf对应,3个与A-Raf对应。
这是一个令人兴奋的发现,因为其他的工作仅能显示Raf的免疫沉淀物可使MAP-激酶磷酸化而激活,如果Raf真能与Ras结合,我们就能找到GTPase单体与MAP-激酶之间的级联中所缺少的一环。
为了验证上述发现所暗示的相互作用是否正确,可构建一些含融合蛋白基因的质粒,如麦芽糖结合蛋白与Raf间的融合蛋白(MBP-Raf)、谷光甘肽-S-转移酶和Ras的融合蛋白(GST-Ras),之后让这两种融合蛋白质粒在细菌中扩增,在直链淀粉亲和柱上通过它们的混合物检验他们结合的能力,而直链淀粉亲和柱可与MBP-Raf结合。用麦芽糖洗脱被束缚的蛋白质,这时会发现一条明显的GST-Ras蛋白随着MBP-Raf蛋白一起洗脱的曲线。这个结论为双杂交系统的遗传学结论提供了生化证据。