你正在研究一个与Mdoney鼠肉瘤病毒片段邻接的受糖皮质激素（甾类激素)调控的基因的表达。你用该病毒片段在报

你正在研究一个与Mdoney鼠肉瘤病毒片段邻接的受糖皮质激素(甾类激素)调控的基因的表达。你用该病毒片段在报道基因(转乙酰酶CAT)的上游或下游以两种方向插入构建一系列质粒，然后转染来源于不同组织的两个细胞系，测量糖皮质激素(地塞米松)存在或不存在时的CAT活性。病毒片段的方向和位置对报道基因的表达的影响相对很少有差别，你希望了解病毒片段是否携带转录增强子。CAT单独和CAT与病毒片段以一个方向构建的表达结果见图14-3-4，细胞系1在不存在地塞米松时，该病毒片段使CAT表达增强20倍，这个结果令人费解。

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发布时间：2022-12-04

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第1题

你正在研究一种在感染周期后期产生一套丰富蛋白质的DNA病毒。其中一种蛋白的mRNA被定位于线状基因组中部的一

个限制性片段。为确定精确位置，你将mRNA与纯化了的限制性片段退火，环境中具有DNA与RNA稳定杂交的双链，DNA两条链不能重新退火。电镜下检查退火的双链，结构如图8-3-28所示。在RNA/DNA杂合双链的末端为什么会有单链尾巴？

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第2题

c-fos基因是FBJ鼠骨肉瘤病毒所携带的癌基因的细胞内同源基因。它的功能未知，c-fos的激活是对于生长因子的最

早的转录反应之一。在小鼠细胞中，c-fos的转录水平在5min内显著增加，在10～15min时达最大值之后突然下降。为了研究人类c-fos基因的瞬时诱导的机制，可以克隆一个DNA片段，它含有全长的转录单元，这个转录单元起始于转录起始点上游-750bp处，终止于+1.5kb的poly(A)加入位点(图13-3-60(1)A)。当把这个克隆转至小鼠细胞中时(我们可以较为容易区分克隆与内源性c-fos基因的mRNA)，一天后加入血清(富含生长因子)刺激细胞生长。你发现同样的瞬时诱导(图13-3-60(2)A)。尽管与小鼠基因相比，时间上有略微的延长。

通过分析一个类似增强子元件(SRE血清反应元件)的一系列缺失突变体，发现在转录起始点上游的300核苷酸序列对于在加入血清后增强转录是必需的。通过建立包含有人β-球蛋白部分基因(它编码一个极为稳定的mRNA)的各种杂交基因来研究c-fos mRNA的稳定性。球蛋白基因的结构和两种杂交基因如图13-3-60(1)B、C、D所示。在低血清浓度下，当杂交基因转染鼠细胞时，24小时后它才对血清作出反应(图13-3-60(2)B、C所示)。

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第3题

一个研究小组正在利用一个环状双链DNA作为一种动物病毒的基因组来研究它的生命周期。实验的第一步是要确定复

制区的位置，同时决定复制是沿起点的单向还是双向进行。为此目的，先分离出复制中的分子，用限制酶在一个位点切割病毒基因组使其成为一个线性分子，然后用电镜来观察所得到的分子。图Q2.7是所观察到的一些分子。(注意：电镜下不可能区分DNA分子的两端。)根据这一结果，如何判断：