黏粒载体DNA组成包括
A.质粒DNA部分
B.入噬菌体的COS黏性末端
C.长末端重复序列(LRT)
D.SV40基因组的一部分
E.反转录病毒基因组的一部分
A.质粒DNA部分
B.入噬菌体的COS黏性末端
C.长末端重复序列(LRT)
D.SV40基因组的一部分
E.反转录病毒基因组的一部分
第3题
A.是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体
B. 既有质粒的特性,又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)
C. 可插入大片段的外源DNA片段
D. 可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库
第4题
噬菌粒(phagemid)pUC118/pUC119载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身的载体,既能合成单链DNA,又能合成双链DNA。
第8题
欲制备45 kb的DNA片段的克隆,应选择的载体和宿主为()。
A.BAC、大肠杆菌
B.YAC、酵母
C.λ噬菌体、大肠杆菌
D.黏粒、大肠杆菌
第10题
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
第11题