用特定的限制性内切酶酶解双链DNA产生DNA片段长度的分析适合构建物理图谱,因为:
A.哪怕只用一种限制酶,DNA的线性化也允许直接确定限制性片段的顺序。
B.内切酶在等距离位点切割DNA,产生了机体特异性的片段长度。
C.DNA的线性化意味着限制性片段长度加起来的总和等于DNA的总长度,凭借双酶切产生的重叠片段可建造明确清楚的物理图谱。
D.这些限制性内切核酸酶的活性,以某种特异性方式被限制。
E.这种技术同时提供核苷酸顺序方面的广泛信息。
A.哪怕只用一种限制酶,DNA的线性化也允许直接确定限制性片段的顺序。
B.内切酶在等距离位点切割DNA,产生了机体特异性的片段长度。
C.DNA的线性化意味着限制性片段长度加起来的总和等于DNA的总长度,凭借双酶切产生的重叠片段可建造明确清楚的物理图谱。
D.这些限制性内切核酸酶的活性,以某种特异性方式被限制。
E.这种技术同时提供核苷酸顺序方面的广泛信息。
第1题
温和噬菌体P4的DNA是线状双链分子,长11.54kb,具粘性末端。用Bam限制酶完全酶解得到长度为6.4、4.1、1.0kb的片段。用Bam部分酶解得到长度为10.5、7.4、6.4、4.1和1.0kb的片段。用DNA连接酶获得的环状P4DNA可以用Bam酶解得到长度为6.4和5.1kb的片段。
第2题
从λ噬菌体提取的DNA是线形双链的,但具有长达12核苷酸残基的以5'-P结尾的单链互补末端(粘性末端)。将此λDNA:①用细菌碱性磷酸酯酶处理;②用γ-32P-ATP(腺苷三磷酸)和多核苷酸激酶处理;③让它在0.1mol/L的NaCl溶液中在5℃下以低浓度放置一星期,使分子环化;④用DNA连接酶处理;⑤用脾磷酸二酯酶和微球菌核酸酶处理。酶解产物再用层析分离鉴定,发现惟一的放射性产物是32P-鸟苷-3'-单磷酸。从这些发现可得到什么信息?
第4题
第5题
第6题
分离到一种突变型噬菌体,其DNA具有以下性质:(1)从该噬菌体提取的DNA沉降时表现为单一组分(A结构),其沉降系数不大受离子强度的影响;(2)A分子不与甲醛反应,且吖啶类化合物使其粘度增加而使沉降系数下降;(3)在pH12.5条件下沉降时表现为两种组分,沉降快的组分的量是慢的组分的两倍(根据吸收值测定);(4)若将A加热至低于解链温度10℃再迅速冷却,可得到B和C两种组分,其沉降系数不同;但若慢慢冷却,则只得到一种沉降组分,且其沉降系数与A相同;(5)用核酸外切酶Ⅲ对A进行部分酶解,再退火,则产生D结构,其沉降系数高于A;(6)D用DNA连接酶处理,产生E,E在碱性条件下沉降表现为单一组分,其沉降速度比较大且变性的A至少快四倍;(7)当poly(G)加入热变性的A中,在CsCl密度梯度中发现两条浮力密度不同的带;(8)若A用连接5'-P和3'-OH和DNA连接酶处理,再通过多核苷酸激酶做32P末端标记,然后酶解至单核苷酸,发现两种放射性核苷酸dAMP和dGMP。若在标记后酶解前将该链打成片段,则发现标记的dGMP与结合有较多poly(G)的那条链结合。该噬菌体DNA具怎样的结构?
第10题
对两个单倍体的面包酵母菌株进行比较,菌株1(交配型α)来自北美,菌株2(交配型a)来自欧洲。用单一的限制性内切酶将DNA线性化后,在凝胶电泳上将DNA分开。菌株1的样品出现两条带,一条很大,另一条很小;菌株2的样品产生两条中等大小的条带。如果运用标准的二倍体出芽方法分析,在二倍体细胞以及细胞所产生的四分子中会得到什么结果(酶切片段是什么样的)?
第11题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题: