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题目内容
（请给出正确答案）
A、这个实验是艾弗里关于遗传物质研究的重要工作
B、这个实验证明DNA的分解产物不是转化因子
C、这个实验是为了证明ADNA的分解产物不是遗传物质
D、这个实验从反面证明了DNA是遗传物质
答案
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第5题
质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。
| 表16-2-11 | |
| 酶混合物 | 片段长度(kb) |
| EcoRI EcoRI，BamHI EcoRI，HpaI EcoRI，SalI EcoRI，BglII EcoRI，PstI PstI，BglII BglII，HpaI | 5.7 0.4，5.3 0.5，5.2 0.7，5.0 1.1，4.6 2.4，3.3 1.3，4.4 0.6，5.1 |
第6题
首先你得切载体DNA，且用碱性磷酸酶去除5'-磷。第二步，把处理过的载体与BamHI切出的cDNA片段混合加入连接酶后温育，连接后将它与感受态细胞混合。最后，将混合物涂布在含抗生素的固体培养基上，杀死所有未转入载体的细胞，而转入了载体的细胞由于其抗生素抗性而存活下来。
克隆手册上提到了四种对照：①未和连接混合物混合的细菌涂平板；②转入未切过的载体的细胞涂平板；③酶切过但未用碱性磷酸酶去除5'-磷的载体，未加外源cDNA片段但加连接酶温育的混合物与感受态细胞混合涂平板；④载体酶切过，碱性磷酸酶处理过，无cDNA片段加连接酶温育后和感受态细胞混合涂平板。
第一次做该实验的实验组和四个对照组借用同宗的感受态细胞，但所有平板上菌落太多而无法数清(见表16-3-40)。第二次做时，采用自己准备的细胞，但没有一个平板上有菌落长出。你又做了一次，这次的结果见表16-3-40。你从样品中挑了几个菌落，提取质粒DNA后用BamHI处理，有九个菌落生成和线状载体相同大小的一条带，但另三个菌落含有你需要克隆的cDNA片段。
| 表16-3-40 Results of Your cDNA Cloning Endeavor | ||||
| 样品制备 | 实验结果 | |||
| 1 | 2 | 3 | ||
| 对照1 对照2 对照3 对照4 实验样品 | 只有细胞 未切的载体 无磷酸化酶、无cDNA 无cDNA | TMTC TMTC TMTC TMTC TMTC | 0 0 0 0 0 | 0 ＞1000 435 25 34 |
| TMTC=too many to count |
第8题
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端，当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构？
第9题
为了区别复制和未复制的模板，利用限制性核酸内切酶(DpnI，MboI和ScuBA)，它们对于所识别序列GATC的甲基化的敏感性不同(如图13-3-52所示)。这个序列一旦在5SRNA的起始处出现，并且如果DNA在这个位点被切割，转录就不能发生。如果模板在野生型大肠杆菌复制，GATC序列的两条链中的A都被细菌中的Dam甲基化酶甲基化，完全甲基化DNA在体外的复制产生子代双螺旋，在第一轮复制中，只有一条链被甲基化，而在以后的复制循环中DNA就无甲基化。你的想法起始于完全甲基化DNA和诱导它在体外进行复制，然后分析用DpnI处理过的复制DNA上的转录。DpnI只切割未复制的完全甲基化DNA，但是它不能切割复制的DNA。因而它对转录有保护作用。
为了验证方案是否起作用，可构建一个比正常的5SRNA基因略长的基因(大基因)，它的RNA转录产物与正常5SRNA基因的转录产物很容易区别(如图13-3-52A所示)。然后将完全甲基化的大基因同甲基化或未甲基化的正常基因混合，在用DpnI、MboI和Sau3A消化前后分别检查它们的转录。限制性内切酶的专一性如图13-3-52A所示。为了验证复制对转录的影响，在完全甲基化的大基因上装配一个转录复合物，诱导复制，并在用限制性内切酶作用前后分别检查转录活性，结果如图13-3-52B所示。
