用Sal Ⅰ切割从噬菌体J2分离的DNA时，得到8个片段，分别是：1.3、2.8、3.6、5.3、7.4、7.6、8.1和11.4kb。但是，用Sal Ⅰ

切割从被感染的寄主细胞中分离到的J2噬菌体DNA时，只得到7个片段，分别是：1.3、2.8、7.4、7.6、8.1、8.9和11.4kb。根据这些结果，你得到哪些信息？

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发布时间：2022-12-04

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第1题

16SrRNA和23srRNA来自同一个30S前体。转录出这个30SrRNA的DNA区段称为rrn。已知rrn在大肠杆菌中是冗余的。根据

饱和杂交法测出的rrn拷贝数为5～10。曾经分离到特殊的转导噬菌体，这些颗粒带有大肠杆菌染色体遗传图上的71分钟、83分钟、88分钟和89分钟处的DNA区段，从而携带rrn，这表明至少存在5个rrn“基因”。rrn基因可能全都一样，因为大肠杆菌的rRNA是均一的。对所有上述5个座位的rrn基因内的DNA限制酶分析得到下述结果：在这些噬菌体的rrn区段中没有Bam位点，但有两个Sal位点，一个在16S编码区内；另一个在23S编码区内，如图16-3-12A所示。为了弄清楚大肠杆菌中rrn的数目，用Bam或Sal限制酶对大肠杆菌DNA或携带rrnDNA的λ转导噬菌体分离的DNA进行完全酶解，用电泳将片段分离。再将条带转移到硝酸纤维素膜，与放射性16SrRNA或23SrRNA杂交。洗涤滤膜，贴在感光胶片上。图16-3-12B所示的是显影的胶片，只有带放射性处才现出黑色带。试根据图中所列数据判断，大肠杆菌中应存在多少rrn基因？

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第2题

人类基因组DNA经过Sau3A（G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上（G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间，二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1)，分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后，电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后，用载体上的DNA作为探针进行杂交，结果如下图所示：

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点，标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2)，用同样的酶切、电泳、转膜后，以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交，结果如下图所示：

画出克隆2的图，标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切，并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交，结果如下图所示：

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第3题

双向复制是在大肠杆菌入噬菌体营养生长期间用电子显微镜对部分变性DNA进行观察而首次发现的。从另一种噬菌体

颗粒中所分离到的部分变性线状DNA具有图6-3-46所示的变性图谱。如果分子正好在线状DNA中间部位单向复制，试绘图表示50%分子复制后的部分变性的环状DNA。另绘制双向复制时的图。

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第4题

噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端，当它感染细菌时该分子环化。图16－3－7的A和B分别显示用Bam限制酶处理

噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端，当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构？

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第5题

核酸酶S1能在双链DNA分子中将不配对的两碱基打断，如果从美国实验室分离到一种品系的λ噬菌体DNA分子与从法国

核酸酶S₁能在双链DNA分子中将不配对的两碱基打断，如果从美国实验室分离到一种品系的λ噬菌体DNA分子与从法国实验室分离到的假定基因型是同一品系的λ噬菌体DNA分子杂交，接近一半的杂交DNA分子被S₁酶切开，请解释。

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第6题

mRNA往往是用各种杂交技术检测的，也就是通过mRNA与单链DNA一起保温，形成DNA－RNA杂交物。有一种技术，把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的，也就是通过mRNA与单链DNA一起保温，形成DNA-RNA杂交物。有一种技术，把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上，加上放射性标记的RNA，然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上，所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中，从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA，然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示，其中的数字表示离DNA左侧的距离，相对距离范围为0～100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验，吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase，该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA)；另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录？

表9-3-10
滤膜上的DNA	滤膜上的cpm
-RNase	+RNase
Ⅰ Ⅱ Ⅲ	1250 1260 1240	1245 418 820

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第7题

入噬菌体的线性基因组DNA两端各有一段20个碱基长的单链突出，它们是可以互补的黏性末端，可以连接

起来，使DNA环化。在试管中分别对线性和环状DNA进行限制酶切割 (EcoRⅠ、BarnHⅠ或同时用二者)，结果如下页图所示： (1)哪个样品是环状DNA分子？ (2)线形DNA总长度是多少？ (3)环状DNA的总长度是多少？ (4)画出线形DNA的限制酶酶切图谱，标明EcoRⅠ和BamHⅠ所有位点。