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[多选题]

纯化基因组DNA必须切割成合适大小的片段才能与载体构成重组,一般常用的切割方法有( )。

A.物理剪切法

B.化学法

C.限制性内切酶消化法

D.生物法

答案
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更多“纯化基因组DNA必须切割成合适大小的片段才能与载体构成重组,一般常用的切割方法有()。 A.物理剪切法 B.”相关的问题

第1题

将下列对应部分连线 a.寡核苷酸 ①用作运载、复制和纯化DNA片段的DNA.分子 b.载体
②收集某物种的DNA片段,再插入载体 c.黏性末端 ③由反转录酶以RNA为模板复制出的DNA拷贝 d.重组DNA ④单链DNA间相互稳定地结合 e.反转录 ⑤扩增DNA片段的快速而有效的手段 f.基因组文库 ⑥推断某段多肽的氨基酸序列所对应的核苷酸序列的方法 g.基因组平衡 ⑦含有从两个不同物种而来的遗传物质 h.cDNA ⑧含有某物种整个基因组的一组DNA片段 i.PCR ⑨存在于许多限制酶酶切片段末端的单链DNA序列 j.杂交 ⑩可用机器合成的短DNA片段

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第2题

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。

通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。

如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。

请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?

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第3题

为了构建真核基因组的精确的物理图谱,应选择下列哪些方法:

A.必须分离纯化出个体染色体。

B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离,这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。

C.必须进行单个染色体分析,这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。

D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。

E.必须先分离核DNA和细胞器DNA,然后用它们来分析个体的图谱。

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第4题

如何分离人的丙氨酸tRNA?如何从基因组文库中找到含有该基因的DNA片段?

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第5题

限制性片段长度多态性(RFLP)()。

A.与基因组DNA个体差异有关

B.用于分析基因缺陷

C.按孟德尔方式遗传

D.DNA分子一级结构差异引起

E.指不同限制性内切核酸酶的酶切差异

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第6题

基因打靶是把已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列______的基因发生______,______到受体细胞基因组中,
并得以表达或使靶基因表达沉默的一种改变生物活体遗传信息的外源基因导入技术。
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第7题

从原位杂交结果知道,5个含有基因组片段的YAC(A~E)杂交到人类基因组某染色体的一条特异的带上。基

从原位杂交结果知道,5个含有基因组片段的YAC(A~E)杂交到人类基因组某染色体的一条特异的带上。基因组DNA被切点稀有的限制性内切酶消化后的产物分别与5个放射性标记的YAC杂交,放射自显影结果如下:

(1)3条限制性酶切条带的顺序如何? (2)分别给出5个YAC与3个酶切片段的相对位置。

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第8题

野生型噬菌体X4DNA用限制酶处理后,用凝胶电泳分离纯化得5个片段Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V。现通过与X4的遗传图(图16-3-9)比

野生型噬菌体X4DNA用限制酶处理后,用凝胶电泳分离纯化得5个片段Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V。现通过与X4的遗传图(图16-3-9)比较来对这些片段定位。用图16-3-9所示5种突变进行25次转染试验。实验包括:从单突变体得到的完整DNA以及纯化的片段,用它对Rec+细胞进行转染。数据如表16-3-9所示(数值表示每微克完整DNA分子产生的噬菌斑数)。试问片段的顺序如何(自图的左边开始)?

表16-3-9

突变体
a-

b-

c

d-

e-

21

6

32681

1

22

14

0

16

3

17 813

21842

4

8

0

27

3

4856

11

1

18

8

2

13

1825

30

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第9题

你正在研究一种在感染周期后期产生一套丰富蛋白质的DNA病毒。其中一种蛋白的mRNA被定位于线状基因组中部的一
个限制性片段。为确定精确位置,你将mRNA与纯化了的限制性片段退火,环境中具有DNA与RNA稳定杂交的双链,DNA两条链不能重新退火。电镜下检查退火的双链,结构如图8-3-28所示。在RNA/DNA杂合双链的末端为什么会有单链尾巴?

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第10题

基因组的大小主要通过______以及DNA序列的______得以增加。
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第11题

自发突变是随机而且平均地发生在基因组的序列上。然而,详细分析显示了DNA的一些位点比其他位点对突变更敏感,这称为“热点”,这是因为:

A.DNA空间结构的暴露部分往往被选择为诱变反应的DNA部分。

B.那些易于进一步获得修饰(如脱氨基作用)的修饰碱基的存在,导致碱基的转变和复制后的突变。

C.在复制中容易错误配对的修饰碱基的存在,产生了突变。

D.富含A·T的DNA片段的存在,这些片段自发解离和形成碱基误配核苷酸。

E.对同义突变的低选择(压力),因此热点总是由于密码子中第三个碱基引起。

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