分离pBR322 DNA可考虑用氯霉素扩增，分离pUC18质粒DNA则不必用氯霉素扩增，为什么？

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发布时间：2022-12-04

更多“分离pBR322 DNA可考虑用氯霉素扩增，分离pUC18质粒DNA则不必用氯霉素扩增，为什么？”相关的问题

第1题

某研究者打算研究两个袋鼠基因A和B在大肠杆菌中的表达。在对基因A进行的实验中，用EcoRI部分酶解袋鼠DNA，将片

段插入质粒pBR322，转化到A基因缺失的大肠杆菌突变体中，并找一种需要A基因活性的选择标记。对基因B的实验是，用反转录酶合成袋鼠肝细胞mRNA，已知肝细胞含有可合成大量酶B的DNA拷贝。然后将这些DNA拷贝插入pBR322，转化到不能合成有功能B酶的大肠杆菌突变体中，将B活性作为选择标记。

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第2题

在分离质粒DNA的菌体培养过程中，加入氯霉素有两个好处：①______；②______。

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第3题

从E.coli中分离到一种hemA突变体，这种突变是不可恢复的，并且需要生长在琥珀酸的平板上才能利用δ-氨基乙酰丙

酸合成血红素。希望利用该突变体去克隆E.coli的hemA基因。首先用Sau3A Ⅰ部分酶切E.coli的DNA，得到的DNA片段平均为2kb，然后将这些片段从BamH Ⅰ位点克隆到质粒pBR322中，连接后转化hemA突变体。根据氨苄青霉素抗性来选择重组体。将筛选到的氨苄青霉素抗性克隆重植在加有δ-氨基乙酰丙酸的平板上进行测试。请问：已经测试的Amp^r抗性转化子中有多少不再需要在培养基中添加琥珀酸？(E.coli基因组的全长为4500kb。)

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第4题

用三种具有不同pH值的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离几种不同蛋白质的混合物，每块凝胶中可看到5条带。问：

(1)能否合理地推断该混合物中仅有5种蛋白质？试作解释。(2)如果这是一组按大小分离的线性DNA片段的混合物，所得结论是否会不同？

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第5题

当DNA放在蒸馏水中时，两条链分离。试解释原因。（提示：考虑溶液中离子对带电荷基团间相互作用的影响。）

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第6题

用限制性内切核酸酶Pst Ⅰ切割质粒pBR322后，再用外切核酸酶Exo Ⅲ进行系列缺失，可得到一系列大小不同的缺失突

变体。

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