用λ噬菌体作克隆载体时,外源DNA片断越小,克隆的成功率越高。()
用λ噬菌体作克隆载体时,外源DNA片断越小,克隆的成功率越高。( )
用λ噬菌体作克隆载体时,外源DNA片断越小,克隆的成功率越高。( )
第3题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
第5题
线状噬菌体DNA分子与除中央10%缺失外其余完全相同的分子杂交。
A.在电镜下看到的该异源双链呈何结构?
B.若所缺失的10%片段被一段长度相同的非同源细菌DNA取代,该异源双链的结构如何?若以上非同源细菌DNA的长度仅为缺失的噬菌体DNA长度之半,则结构有何变化?
第6题
第9题
A.基因载体的选择与构建
B.外源基因与载体的拼接
C.重组DNA分子导入受体细胞
D.筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞
E.表达目的基因编码的蛋白质
第10题
试述重组DNA技术中所用的术语:克隆(cloning)和载体(vector或vehicle)。