第4题
A.DNA病毒变异率很高
B.DNA病毒基因组中,不同基因可以不同的链作为转录模板
C.DNA病毒和宿主细胞的启动子序列常有相当大的相似性
D.DNA病毒的复制和转录常常在宿主细胞质中进行
E.基因组以双链DNA为多数
第5题
双链DNA病毒的复制特点是()
A.病毒核酸既起MRNA作用,又起模板作用复制病毒核酸
B.核内复制核酸,胞浆内合成病毒蛋白,核内装配成熟
C.带有RNA多聚酶,以病毒核酸为模板转录MRNA
D.必须先以其负链RNA为模板复制出正链RNA
E.构成RNA:DNA杂交中间体
第6题
A.致癌病毒只有逆转录,没有转录
B.编码链与转录生成的RNA碱基顺序,除了T变为U外其他都相同
C.编码链与转录生成的RNA互补
D.RNA聚合酶需要引物
E.DNA复制中合成RNA引物也是转录反应之一
第7题
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。
第8题
为了区别复制和未复制的模板,利用限制性核酸内切酶(DpnI,MboI和ScuBA),它们对于所识别序列GATC的甲基化的敏感性不同(如图13-3-52所示)。这个序列一旦在5SRNA的起始处出现,并且如果DNA在这个位点被切割,转录就不能发生。如果模板在野生型大肠杆菌复制,GATC序列的两条链中的A都被细菌中的Dam甲基化酶甲基化,完全甲基化DNA在体外的复制产生子代双螺旋,在第一轮复制中,只有一条链被甲基化,而在以后的复制循环中DNA就无甲基化。你的想法起始于完全甲基化DNA和诱导它在体外进行复制,然后分析用DpnI处理过的复制DNA上的转录。DpnI只切割未复制的完全甲基化DNA,但是它不能切割复制的DNA。因而它对转录有保护作用。
为了验证方案是否起作用,可构建一个比正常的5SRNA基因略长的基因(大基因),它的RNA转录产物与正常5SRNA基因的转录产物很容易区别(如图13-3-52A所示)。然后将完全甲基化的大基因同甲基化或未甲基化的正常基因混合,在用DpnI、MboI和Sau3A消化前后分别检查它们的转录。限制性内切酶的专一性如图13-3-52A所示。为了验证复制对转录的影响,在完全甲基化的大基因上装配一个转录复合物,诱导复制,并在用限制性内切酶作用前后分别检查转录活性,结果如图13-3-52B所示。
第9题
在真核生物中,双链DNA的交换是一种普遍的现象(如在减数分裂过程中的双交换)。而在单倍体的原核生物中,双链DNA的重组性交换是很少见的。
第11题
写出两段RNA序列,它们是从下面的DNA双链完全转录的。
5'AGCTGCAATG3'
3'TCGACGTTAC5'
指明转录出的RNA的5'端和3'端。