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[主观题]

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。 图02.2一个具有单链缺口的双链DNA分

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。    图02.2一个具有单

图02.2一个具有单链缺口的双链DNA分子

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第1题

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。 图Q2.2一个具有单链缺口的双链DNA分

图Q2.2中的DNA片段两端为双链,中间为单链,上面一条链的极性已标出。

图Q2.2一个具有单链缺口的双链DNA分子

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第2题

图6-3-5中,DNA片段两端是双链,但中间是单链,上链的极性已标记。

图6-3-5中,DNA片段两端是双链,但中间是单链,上链的极性已标记。

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第3题

两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同

两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同源双链和异源双链。同源双链含来自同一份DNA样品的两条链,而异源双链则含来自两份不同DNA样品的链。两份DNA样品的顺序差异导致了异源双链中因不能形成氢键配对而保持单链状态的非互补区域。若这些区域长度大于50至100个核苷酸;则在电镜下呈环状。图B显示两种常见的异源双链结构。异源双链DNA的检测对于大片段缺失、碱基添加以及取代的定位是很有效的方法。试利用图中的数据构建一个野生型DNA的图谱,算出突变型中片段缺失的位置。

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第4题

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参

四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。

通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。

如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。

请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?

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第5题

你正在研究一种在感染周期后期产生一套丰富蛋白质的DNA病毒。其中一种蛋白的mRNA被定位于线状基因组中部的一
个限制性片段。为确定精确位置,你将mRNA与纯化了的限制性片段退火,环境中具有DNA与RNA稳定杂交的双链,DNA两条链不能重新退火。电镜下检查退火的双链,结构如图8-3-28所示。在RNA/DNA杂合双链的末端为什么会有单链尾巴?

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第6题

有一个30个碱基对的双链DNA片段,且含lac操纵基因顺序,把它插入到质粒中去。把该质粒引入到基因型为i+z+y+的

有一个30个碱基对的双链DNA片段,且含lac操纵基因顺序,把它插入到质粒中去。把该质粒引入到基因型为i+z+y+的大肠杆菌菌株。一旦构建成功,在每个细胞中就有30个拷贝的质粒。

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第7题

一段病毒双链DNA片段中的一条链序列如下,该双链DNA片段编码称为vir-1和vir-2的两种肽。将这段双链DNA片段加
入到体外转录和翻译体系中可以产生10残基肽(vir-1)和5残基肽(vir-2)。

AGATCGGATGCTCAACTATATGTGATTAACAGAGCATGCGGCATAAACT

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第8题

假定有一个DNA分子,在它的一条链上有一长达5000个核苷酸、两端为3'-OH和5'-P基团的缺口。如果在离体
条件下把DNA聚合酶加到这个分子中去(还包括合成DNA所需要的其他物质),那么填补这个缺口将是整条片段还是一些短片段?如果这个缺口在体内填补,又该是怎样的片段?
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第9题

某双链DNA,以32P标记5’端,然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到下列长短的片段(单位为kb),*表示带标

某双链DNA,以32P标记5’端,然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到下列长短的片段(单位为kb),*表示带标记片段。 EcoRⅠ:2.8、4.6、6.2 *、7.4、8.0 * BamHⅠ:6.0 *、10.0 *、1 3.0 如果不带标记的DNA用两种酶同时切割,会得到下列片段:1.0,2.0,2.8,3.6,6.0,6.2,7.4。 两种酶的酶切图谱是什么?

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第10题

温和噬菌体P4的DNA是线状双链分子,长11.54kb,具粘性末端。用Bam限制酶完全酶解得到长度为6.4、4.1、1.0kb的片

温和噬菌体P4的DNA是线状双链分子,长11.54kb,具粘性末端。用Bam限制酶完全酶解得到长度为6.4、4.1、1.0kb的片段。用Bam部分酶解得到长度为10.5、7.4、6.4、4.1和1.0kb的片段。用DNA连接酶获得的环状P4DNA可以用Bam酶解得到长度为6.4和5.1kb的片段。

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第11题

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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