两种限制酶分别作用于两份DNA样品,得到两组不同片段,是否可能在第一组中有一片段的长度(指核苷酶数)与第二
两种限制酶分别作用于两份DNA样品,得到两组不同片段,是否可能在第一组中有一片段的长度(指核苷酶数)与第二组中的某片段相同?
两种限制酶分别作用于两份DNA样品,得到两组不同片段,是否可能在第一组中有一片段的长度(指核苷酶数)与第二组中的某片段相同?
第1题
两份几乎相同的DNA样品(例如从突变型和野生型病毒X得到的DNA分子)混合、变性、再退火,可得如图2-3-24所示的同源双链和异源双链。同源双链含来自同一份DNA样品的两条链,而异源双链则含来自两份不同DNA样品的链。两份DNA样品的顺序差异导致了异源双链中因不能形成氢键配对而保持单链状态的非互补区域。若这些区域长度大于50至100个核苷酸;则在电镜下呈环状。图B显示两种常见的异源双链结构。异源双链DNA的检测对于大片段缺失、碱基添加以及取代的定位是很有效的方法。试利用图中的数据构建一个野生型DNA的图谱,算出突变型中片段缺失的位置。
第2题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:
第3题
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端,当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构?
第5题
第6题
限制酶A和B分别用来切割噬菌体T5和T7的DNA。某段T5片段与某段T7片段混合形成环,并可用DNA连接酶封口。对这两种酶可得出什么结论?
第8题
温和噬菌体P4的DNA是线状双链分子,长11.54kb,具粘性末端。用Bam限制酶完全酶解得到长度为6.4、4.1、1.0kb的片段。用Bam部分酶解得到长度为10.5、7.4、6.4、4.1和1.0kb的片段。用DNA连接酶获得的环状P4DNA可以用Bam酶解得到长度为6.4和5.1kb的片段。
第10题
用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火,用DNA连接酶处理,然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌落。从这些菌落中分离出质粒DNA,进行凝胶电泳,结果发现有两类菌落:一类菌落在原来质粒的预期位置处出现一条带;另一类菌落则得到一条移动慢得多的带。这条移动慢的带可能是何物?(用BglI酶处理Kan-rAmp-r质粒会破坏amp基因)
第11题
某双链DNA,以32P标记5’端,然后分别用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到下列长短的片段(单位为kb),*表示带标记片段。 EcoRⅠ:2.8、4.6、6.2 *、7.4、8.0 * BamHⅠ:6.0 *、10.0 *、1 3.0 如果不带标记的DNA用两种酶同时切割,会得到下列片段:1.0,2.0,2.8,3.6,6.0,6.2,7.4。 两种酶的酶切图谱是什么?