第1题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
第2题
下列限制酶哪个或哪些可以准确切割下一段cDNA?这段cDNA可以编码多肽KIGPACF(N代表任一种核苷酸)。
限制酶 识别序列
AluI AGCT
Sau96I GGNCC
HindⅢ AAGCTT
第5题
A.内切酶只切两个变体中的一个。
B.它利用限制位点作为遗传标记。
C.一个给定细胞中的等位基因的核苷酸顺序从不相同。
D.它不依赖变体产物的功能。
E.对于DNA中的编码区,内切核酸酶的切点被限制。
第11题
A.修饰δ因子的酶(SMEs)把普通的δ因子修饰成不同特异性的δ因子。这种特异的δ因子能识别应激启动子。
B.不同的基因编码不同的δ因子,这些δ因子能识别不同启动子的共有序列。
C.不同种的细菌产生不同的δ因子,这些δ因子可以进行水平交换。
D.δ因子参与到起始复合物依赖于核心酶的种类。
E.δ因子是一种没有特异性的蛋白质,它对于每一种RNA聚合酶来讲都是一种必需因子。