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假定你制取了两个DNA样品，一个正常，另一个变性，各用0.01mol/L NaCl溶液透析过。透析前并不知道A₂₆₀值。然后，每个样品中各加入少量酶，这时，两个样品搞混了。如何用吸收值来区别这两个样品？假定检测中用去了一小部分样品，且酶不会干扰测定。再设计第二种检测方法，确定它不需引入其他试剂或引起变性的条件。

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发布时间：2022-12-04

更多“假定你制取了两个DNA样品，一个正常，另一个变性，各用0.01mol/L NaCl溶液透析过。透析前并不知道A260值。然后，”相关的问题

第1题

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假定某种噬菌体颗粒含有小的线性单链DNA分子。通过CsCl离心研究它的复制方式。在CsCl中，它的密度是1.714g/cm³。含¹⁴C标记DNA的噬菌体感染生长在含³H的培养液中的细菌。于不同时间里取样，分离出DNA，对各样品进行离心。所得结果示于图6-3-42。试问这种噬菌体怎样复制它的DNA？你认为子代噬菌体会不会有¹⁴C标记？

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第2题

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来自小鼠和大鼠的DNA样品中的G+C分别占总碱基数的44%和40%，计算这两个DNA在0.2molNaCl中的T_m。由于不小心将两个样品混合了，你能想个办法将它们分开吗？

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第3题

如果你想将一个DNA双螺旋样品制成具有高放射性的DNA探针，你拥有可以从DNA内部切开产生3'-OH末端和5'

;-磷酸末端的DNA内切酶、完整的DNA聚合酶Ⅰ和放射性dNTPs，提出一个制作DNA放射性的方法。

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第4题

特殊转录因子的纯化给人带来很多困难，因为分析速度慢，并且转录因子本身不稳定，当你鉴定出你所需片段时，这个

因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列，将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育，这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成，如果不加GTP，只产生一定长度的RNA转录本，这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现，则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。

为了验证你的想法，你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1)，另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及³²P-CTP混合，除此之外，再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链，它就会终止转录)，通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。