第1题
你在一种高效的克隆载体λYES(酵母一大肠杆菌中穿梭)中构建了一个cDNA文库,这种载体是由细菌噬菌体λ基因和一种可在大肠杆菌和酵母中复制的质粒重组而成,它结合了病毒和质粒克隆载体的优点。cDNA可以插入到载体的质粒部分,这样就可以在体外被包装进一个病毒衣壳,包装后的载体感染E.coli比质粒自身更有效,一旦进入E.coli,在λYES中的质粒序列可诱导脱离λ基因组进行重组并可自我复制,这就使cDNA在质粒上与λ分离,这就有利于以后的操作。
为了使克隆效率最大,载体和cDNA均用特殊的方法加以制备,在载体DNA单一独特的XhoI位点切割(5'-CTCGAG)后在dTTP存在下与DNA多聚酶一起孵育,一个制备好的钝端cDNA与一个双链寡核苷酸接头连接,这个接头由两个寡核苷酸5'-CGAGATTTACC和5'-GGTAAATC组成,其5'-末端均有磷酸基团,然后DNA和cDNA混匀并进行连接。这个方案证实非常有效,用2μg载体和0.1mg cDNA,你可以得到4×107重组分子组成的文库。
第2题
酵母的两种不同的环状质粒DNA载体(YP1和YP2)用于将leu-转化成leu+,从这两种质粒转化获得的leu+培养物,都能与leu-表型的细胞交配。
YP1leu+×leu-→所有的子代表型都是leu+,所有子代的DNA都能与YP1特异探针显示阳性反应;
YP1leu+×leu→一半的子代为leu+,能够与YP2特异的探针杂交,另一半为leu-,不能与YP2特异探针杂交。
解释这两种不同质粒转化造成的差异。
第4题
在单倍体酵母中,arg-ad-nic+leu+与arg+ad+nic-leu-杂交产生单倍体有性孢子,随机选择其中的20个进行培养,得到以下结果(Arg表示精氨酸,Ad表示腺嘌呤,Nic表示尼克酰胺,Leu表示亮氨酸;“十”表示生长,“一”表示不能生长):
(1)这些基因的连锁情况如何? (2)第16号培养物是如何产生的?
第8题
A.子代中重组子比例越小,则基因(性状)连锁越紧密。
B.亲代与子代染色体结构的不同表明了在减数分裂中出现了遗传重组(表现为交叉)。
C.对来源于亲代的两个性状,其F2后代的重组子相当多,则这两个性状紧密连锁,各自在同一条染色体上,位点彼此非常靠近。
D.在单一染色体上两个位点之间的最大重组是50%,其原因是互相连接的四条染色单体中只有两条染色体参与各自的重组事件。
E.突变分析可以用来表明基因本身并非必须具有线性结构,然而基因在染色体上的分布是线性的。
第10题
A.遗传基础和环境因素共同作用的结果
B.遗传基础作用的大小决定的
C.环境因素作用的大小决定的
D.多对基因的分离和自由组合作用的结果
E.主基因作用
第11题
A.遗传基础和环境因素共同作用的结果
B.遗传基础的作用大小决定的
C.环境因素的作用大小决定的
D.多对基因的分离和自由组合的作用结果
E.主基因作用