第3题
(注:本题是由实验来测定线圈Q值的一种方法。)
第6题
由天然植物种子中获得的一种具有碳碳三键的化合物叫赤原酸(C18H26O2),当它暴露在阳光下时,生成鲜红色的聚合物。赤原酸催化加氢时可吸收5mol氢,得到化合物的结构式为CH3(CH2)16COOH。
(a)这个实验关于赤原酸的结构给我们提供什么重要线索?
(b)请写出至少四种赤原酸的可能结构。
(c)赤原酸和O3反应接着用水处理臭氧化物得到四种产品:,HOOC(CH2)4COOH,HOOC—COOH和HOOC(CH2)7COOH。这个实验使赤原酸结构式的可能性只局限于2个。它们是什么?
(d)当和的醇溶液用氯化亚铜,氨和氧处理时,发生偶合反应,从反应混合物中可析出三种产品:一种是无酸性的,一种是一元羧酸和一种是二羧酸。这个一元羧酸是赤原酸,请写出它的结构。
第7题
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。
第8题
测定一个蛙红细胞膜上β-肾上腺素受体的数量,这些受体通常与肾上腺素结合并刺激腺苷酸环化酶的活性。选择一种肾上腺素的竞争性抑制剂alprenolol与受体结合,该抑制剂比肾上腺素与受体结合更牢固。最基本的实验方案是:将标记了的alprenolol与红细胞膜混合,37℃下温育10分钟,离心沉淀膜并测量沉淀中的放射性。用两种方式处理实验。
首先,测量与一定数量的红细胞膜结合的3H-alprenolol的增加量,以确定总的结合量。
其次,在过量的未标记的alprenolol存在的情况下重复实验,测量非特异性的结合,其结果如图14-3-8所示。
第10题