RNA酶保护分析法(RNase protection assay,RPA)
RNA酶保护分析法(RNase protection assay,RPA)
RNA酶保护分析法(RNase protection assay,RPA)
第2题
第3题
mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?
表9-3-10 | ||
滤膜上的DNA | 滤膜上的cpm | |
-RNase | +RNase | |
Ⅰ Ⅱ Ⅲ | 1250 1260 1240 | 1245 418 820 |
第6题
用RNase T1降解长度为13个核苷酸的RNA片段,得到4种产物:(a)ApCpApGp,(b)pGp,(c)ApCpu和(d)ApApU—pApGp,用RNase I降解得到另外4种产物: (1)ApGpApApu,(2)pGpApC,(3)u和(4)ApGpApcp。根据以上资料写出该片段的碱基序列。
第7题
有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的优点是
A.碱基与特殊染料间不同的相互作用
B.一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止
C.可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序
D.限制性位点与DNA末端标记的相关性
E.反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支
第8题
写出下列反应的产物: (a)蛇毒磷酸二酯酶作用于ApupApApCpU; (b)牛胰RNase作用于ApUpApApCpU; (c)蛇毒磷二酯酶作用于dTpdApdCpdGpdCp;(d)稀酸作用于dTpdApdCpdGpdGpdCpdA; (e)稀碱作用于dTpdApdCpdCpdGpdCpdA
第9题
第10题
A.在第一步转酯反应中,充当核酸内切酶
B.保护SnRNA免受降解
C.识别剪接点交界处的GU-AG序列
D.促进SnRNA的正确折叠,有利于RNA调节的催化
E.促进已加工的mRNA运输出细胞核
第11题
A.单链DNA结合蛋白(SSB)维持模板单链状态
B.单链DNA结合蛋白(SSB)保护模板
C.引物酶是依赖DNA的RNA聚合酶
D.真核生物DNA连接酶需NAD+