有一DNA碱基序列5-ATG ATA GOA CAC GAA TGA OAT AAT GAT CTT-3’,①请写出它的互补链的顺序;②若以
第1题
用一限制性内切核酸酶切割Lac+Tetr的质粒载体,已知该酶识别的是4个碱基序列,并产生有两个碱基突出的单链末端,该酶在lac基因内有切割位点,并在第二个氨基酸密码子内,该位点可以被任何氨基酸所取代而不影响酶活性。用该酶切割后,用DNA聚合酶将单链末端补齐为双链的平末端,然后重新连接成环,转化Lac-Tets受体菌,筛选Tetr转化子,问:Lac的基因型是什么?并说明原因。
第2题
克隆文库的构建通常是以一个识别4个碱基序列的限制酶(这些酶切割频率相对较高,平均每256碱基对有1个切点)不完全消化基因组DNA完成的。酶Sau3AI识别序列是5'-\GATC-3'(只写上面一条链,\表示切割位点)。这个位点有一个优点,即Sau 3AI消化片段可被克隆入以BamHI(5'-G\GATC-3')或BglⅡ(5'-A\GATCT-3')消化的载体上。图16-3-17是YFG1基因周围Sau3AI位点的限制性图谱,请列出以Sau3AI完全消化这个片段得到限制性片段的大小,以及不完全Sau3AI消化时产生片段的大小。如果分离一个包含完整YFGl基因的片段,以不完全消化建立文库的重要性在哪里呢?
第5题
第6题
第9题
有两种确定核酸中核苷酸序列的方法:化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的优点是
A.碱基与特殊染料间不同的相互作用
B.一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止
C.可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序
D.限制性位点与DNA末端标记的相关性
E.反应是DNA特异的,RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤,也节约了开支