重组可以由单链和双链的断裂引起。
A.在同源性单链的同化作用中,单链的断裂是必需的。
B.在两条DNA双链间的单链交换时,单链的断裂是必需的。
C.双链的断裂起始由供体双链的D-环状链取代,以及随后的单链DNA合成。产生切口作用和连接作用形成了两小段的双链。
D.为了避免基因信息的丢失,一个双链缺口需要来自另一条同源性双链的序列来修复。
E.对RecBCD促进的重组的起始来说,一个双链的断裂是必需的。
A.在同源性单链的同化作用中,单链的断裂是必需的。
B.在两条DNA双链间的单链交换时,单链的断裂是必需的。
C.双链的断裂起始由供体双链的D-环状链取代,以及随后的单链DNA合成。产生切口作用和连接作用形成了两小段的双链。
D.为了避免基因信息的丢失,一个双链缺口需要来自另一条同源性双链的序列来修复。
E.对RecBCD促进的重组的起始来说,一个双链的断裂是必需的。
第1题
A.双链经常断裂的位置,在这个位置依次引导了重组。
B.单链经常断裂的位置,这个位置导致了单链的同化作用。
C.使双链断裂的RecBCD复合体切割3'-自由末端的位点。
D.一些能允许产生其3'-自由末端的单链的顺式作用元件。
E.RecA蛋白的DNA结合位点,从这个位点开始,RecA蛋白沿着DNA搜索,直到遇到一个断裂点。
第2题
噬菌体T4编码一个对重组和DNA复制很重要的单链DNA结合蛋白(SSB蛋白)。含有编码SSB蛋白温度敏感型基因的噬菌体T4突变体在升高温度时会快速地终止重组和DNA复制。噬菌体T4 SSB蛋白是分子质量为35 000Da的单体蛋白,它和单链而不是双链DNA紧密结合,结合体中DNA与蛋白质的重量比为1:12。然而SSB蛋白和DNA的结合显示出一个很特别的性质,如图Q13.4所示。当单链DNA过量时(10μg),而SSB蛋白为0.5μg时则完全检测不到结合体[图Q13.4(a)],然而当SSB蛋白为7.0μg时,可以看见许多二者的结合体[图Q13.4(b)]。
图Q13.4噬菌体T4 SSB蛋白与单链DNA的结合通过蔗糖梯度离心分析,发现DNA较蛋白质重得多,沉得快,因此更靠近梯度的底部
第3题
T4噬菌体能编码一种与单链DNA结合的蛋白(即SSB蛋白)。SSB蛋白对于重组和DNA的复制相当重要,编码SSB蛋白的基因部位产生的温度敏感突变T4突变体在温度升高时,能迅速地停止重组和DNA复制。T4的SSB蛋白是一个分子量为35000U的伸长的单体蛋白,它能紧密结合单链DNA,而不能结合双链DNA。在DNA与蛋白质量达到1:12时结合达到饱和。然而,图12-3-16表明,SSB蛋白结合DNA有一个特殊的性质。在10μg过量单链DNA存在下,有0.5μgSSB蛋白质时实际上没有结合,而在7.0μgSSB蛋白质存在时,可观察到几乎所有定量的结合。
第4题
A.RecA蛋白依赖于ATP的蛋白水解酶活性。
B.RuvAB解旋酶复合体依赖于ATP的蛋白水解酶活性。
C.RecBCD蛋白复合体的活性。
D.由于卷曲而引起的DNA分子上的张力。
E.侵入链和受体链之间随意的碱基配对。
第5题
大肠杆菌噬菌体ФX174中()和(-)的环状单链DNA(由双链复制型分离)在转染实验中都具有感染力吗?
第6题
图12-3-18中表示出了两个同源的亲本双链和可能存在的两种重组产物在能产生所示重组产物的亲本双链间画出的连接体(Holliday junction)。连接体的每条链的左端标明是5'-末端还是3'-末端,以清楚地显示亲本双链与重组体双链之间的关系。写出每种类型的重组产物产生时需要切开哪些链。最后,请画出经过一次复制后的重组体。
第7题
A.在两个含有同源基因的序列间重组称为同源性重组。
B.在两个精确互补序列(没有单个碱基的增加或减少)间的重组称为同源性重组。
C.在包含有高度相似性片段的序列之间的重组称为同源性重组。
D.在任何同源性序列的一条双链间的重组称为同源性重组。
E.在特异性序列间,由酶催化物仅仅作用于特殊的靶序列的重组称为位点特异性重组。
第8题
第10题
第11题
用Maxam-Gilbert法测定单链DNA分子的核苷酸顺序。一份DNA样品进行四种不同处理。
(1)DNA与硫酸二甲酯反应,该试剂使G和A都甲基化.但与G的反应快5倍。然后加热DNA,这样可除去甲基化的G和A残基。然后加碱,这时与甲基化碱基相连的糖从两侧的磷酸二酯键上断裂下来。
(2)如第1步中用硫酸二甲酯处理后将DNA放入稀酸溶液;这种处理使A优先脱落。在碱性条件下DNA的磷酸二酯键断裂。
(3)DNA与肼反应,再用吡啶处理。和第1和第2步的结果一样,磷酸二酯键发生断裂,但在T和C部位断裂频率相同。
(4)在2mol/LNaCl中进行第3步处理;这样可防止T处的断裂。这几步反应控制在每50个碱基中有一个发生甲基化或肼解反应。进行彻底水解反应。每组反应混合物由一组片段组成,它们的长度由特定碱基的位置决定。聚丙烯酰胺凝胶电泳可将每组混合物中的片段根据长度进行分离。通常DNA末端用32P标记,这样凝胶中的片段可以用放射自显影定位。根据每个位置上带的密度可以从凝胶上读出顺序。须注意的是带的位置可确定碱基的部位,但是带的密度与断裂的几率有关。图2-3-49显示某样品的有关图谱。