原位杂交是指()
A、在NC膜上进行杂交分析
B、在组织切片或细胞涂片上进行杂交分析
C、直接将核酸点在NC膜上进行杂交分析
D、在PVDF膜上进行杂交分析
E、在凝胶电泳中进行杂交分析
A、在NC膜上进行杂交分析
B、在组织切片或细胞涂片上进行杂交分析
C、直接将核酸点在NC膜上进行杂交分析
D、在PVDF膜上进行杂交分析
E、在凝胶电泳中进行杂交分析
第2题
原位杂交:
A.是这样一种技术:标记DNA与整个染色体杂交,在显微镜下可见杂交的位点。
B.证明了卫星DNA是完全散开分布的。
C.证明了卫星DNA位于染色体着丝粒处。
第6题
从原位杂交结果知道,5个含有基因组片段的YAC(A~E)杂交到人类基因组某染色体的一条特异的带上。基因组DNA被切点稀有的限制性内切酶消化后的产物分别与5个放射性标记的YAC杂交,放射自显影结果如下:
(1)3条限制性酶切条带的顺序如何? (2)分别给出5个YAC与3个酶切片段的相对位置。
第7题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。
第8题
第9题
从正常细胞和反转录病毒(不含癌基因)感染的细胞(克隆1)中,分别分离出DNA,用限制酶酶切后做电泳并转膜。以某原癌基因的cDNA作探针进行杂交,结果如下图所示:
反转录病毒插入位置在哪里?
第11题
爪蟾卵母细胞在卵的发育后期用3H-尿苷同步标记。从卵母细胞中分离的放射性细胞质总RNA与由成体爪蟾提取的且呈单链形式结合在滤膜上的DNA进行杂交。该RNA:DNA杂交分子与原肠胚期爪蟾胚胎的非标记细胞质总RNA相竞争。图13-3-68A是假设的结果。在另一相应但相反的实验中,放射性原肠胚期细胞质RNA(原肠胚期胚胎用3H-尿苷标记)与滤膜上的总DNA杂交,该RNA:DNA杂交分子与非标记的后期卵细胞质RNA相竞争,结果如图13-3-68B。