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[主观题]

碱性磷酸酶可在载体和待克隆的片段上形成同聚物尾，以便于进行克隆。（)

碱性磷酸酶可在载体和待克隆的片段上形成同聚物尾，以便于进行克隆。( )

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发布时间：2022-12-04

更多“碱性磷酸酶可在载体和待克隆的片段上形成同聚物尾，以便于进行克隆。（)”相关的问题

第1题

候选克隆法克隆基因的步骤有（)

A.通过DNA连锁分析确定待分离基因在染色体上的大概位置

B.进行分子杂交，定位基因在染色体上的具体位置

C.研究该区域内的已知基因、ORF、EST或cDNA片段，确定进一步研究对象

D.通过cDNA筛选、外显子捕获或物理捕获法在该区域内寻找和鉴定基因

E.对找到的“基因”的核苷酸序列进行分析，推测其功能

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第2题

人类基因组DNA经过Sau3A（G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上（G↓GATCC)。BamHⅠ位于

人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后，连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间，二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1)，分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后，电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后，用载体上的DNA作为探针进行杂交，结果如下图所示：

假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点，标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2)，用同样的酶切、电泳、转膜后，以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交，结果如下图所示：

画出克隆2的图，标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切，并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交，结果如下图所示：

其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。

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第3题

从E.coli中分离到一种hemA突变体，这种突变是不可恢复的，并且需要生长在琥珀酸的平板上才能利用δ-氨基乙酰丙

酸合成血红素。希望利用该突变体去克隆E.coli的hemA基因。首先用Sau3A Ⅰ部分酶切E.coli的DNA，得到的DNA片段平均为2kb，然后将这些片段从BamH Ⅰ位点克隆到质粒pBR322中，连接后转化hemA突变体。根据氨苄青霉素抗性来选择重组体。将筛选到的氨苄青霉素抗性克隆重植在加有δ-氨基乙酰丙酸的平板上进行测试。请问：已经测试的Amp^r抗性转化子中有多少不再需要在培养基中添加琥珀酸？(E.coli基因组的全长为4500kb。)

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第4题

以下哪个不是Southern blot的一个步骤？

A.用限制酶消化DNA。

B.把DNA连接入一个载体。

C.在胶上分离DNA片段

D.把DNA片段转移到硝酸纤维素膜上。

E.膜与标记的探针杂交。

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第5题

质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb（5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×10³个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物

片段长度(kb)

EcoRI

EcoRI，BamHI

EcoRI，HpaI

EcoRI，SalI

EcoRI，BglII

EcoRI，PstI

PstI，BglII

BglII，HpaI

5.7