第1题
细菌中的终止密码子是由两种蛋白质中的一种解读的。释放因子1(RF1)识别UAG和UAA,而RF2则识别UGA和UAA编码RF1和RF2的基因已被克隆和测序。比较了编码RF2的基因核苷酸序列与蛋白质的氨基酸排列顺序后,有一惊人的发现,如图Q11.4中基因图谱所示,终止密码包含在基因序列之中。为排除干扰,基因和蛋白质的序列已经过仔细的检查。请问:
图Q11.4 RF2基因图
粗线表示编码序列,开始和结束处的序列作为参照
第2题
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。
第4题
第8题
I M Y K Q V A Q T Q L *
AUU AUG UAU AAG UAG GUC GCA UAA ACA CAA UUA UGA GAC UUA
实验中遇到了一些困难,主要是不能利用网织红细胞(一种体外分析蛋白质合成的标准系统)的裂解产物来翻译经纯化的四膜虫mRNA。尽管mRNA的质量很好,但翻译产物却都是小分子多肽(图Q11.1,泳道1)。为了找出不能正确翻译蛋白质产物的原因,用来自烟草花叶病毒(TMV)编码的一个分子质量为116kDa的蛋白质的纯化mRNA进行了一系列对照实验。在体外系统中,TMV mRNA可被很好地翻译,在116kDa处显现一主带和一个极弱的约50kDa的小带(图Q11.1,泳道2)。加入四膜虫RNA后,较大分子质量的产物有显著增加(图Q11.1,泳道3)。加入一些四膜虫的细胞浆(去除了核糖体),TMV mRNA几乎专一地产生分子质量较大的产物(图Q11.1,泳道4)。令人高兴的是先前无活性的四膜虫mRNA现在似乎可以被翻译了(图Q11.1,泳道4)。去除TMV mRNA后,这种推测得到证实(图Q11.1,泳道5)。
图Q11.1在来自四膜虫的各种成分加入或缺省时TMV mRNA的翻译
请问:
第9题
A.修饰δ因子的酶(SMEs)把普通的δ因子修饰成不同特异性的δ因子。这种特异的δ因子能识别应激启动子。
B.不同的基因编码不同的δ因子,这些δ因子能识别不同启动子的共有序列。
C.不同种的细菌产生不同的δ因子,这些δ因子可以进行水平交换。
D.δ因子参与到起始复合物依赖于核心酶的种类。
E.δ因子是一种没有特异性的蛋白质,它对于每一种RNA聚合酶来讲都是一种必需因子。
第10题
A.是一种不同基因共用一部分DNA序列的现象
B.重叠的基因间阅读框架不相同
C.不同的重叠基因编码同一种蛋白质
D.重叠基因的存在,是一种对DNA的“节约”