用125I和3H来进行标记,要求标记物
A.标记物用量应低于或等于被测物的最小量,定量范围一般在10-9~10-12g水平
B.标记物要有较高的比活度
C.标记物的放射化学纯度在95%以上
D.保证抗原抗体结合的免疫活性在标记过程中不被破坏
E.对标记物注意保存过程中发生的变化,如:辐射自分解等
A.标记物用量应低于或等于被测物的最小量,定量范围一般在10-9~10-12g水平
B.标记物要有较高的比活度
C.标记物的放射化学纯度在95%以上
D.保证抗原抗体结合的免疫活性在标记过程中不被破坏
E.对标记物注意保存过程中发生的变化,如:辐射自分解等
第2题
第3题
由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质,未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的3H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸,然后经过纸层析分析放射性的嘌呤,结果如图Q12.2所示:
图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤;虚线表示MNNG处理的细菌所得结果
为了研究诱变损伤切除的机制,首先纯化负责切除的酶,把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被3H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育,分析切除动力学。在不同时间取样,分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时,虽然最初的切除速率较慢,却得到一样的终点。
图Q12.3纯化的甲基转移酶把3H标记的甲基从DNA上切除所示为纯化酶的量
第4题
考虑下面血红蛋白α、β链协调合成的实验。家兔的网织红细胞被3H—Lys标记10min(标记时间相对一条珠蛋白单链的合成是足够的),然后离心分离带新生链的核糖体,除去可溶珠蛋白。新生珠蛋白链被胰蛋白酶消化,使肽链C端以Lys或Arg结尾,接着用HPLC(高效液相色谱)分离出这些肽并测定它们的放射性。图Q11.2为每条肽链中相对Lys残基的位置的放射性标志图。
图Q11.2 α-珠蛋白、β-珠蛋白的合成
第5题
在RNA聚合酶的分析中,3H-UTP作为标记的核苷酸,它的比活性是500μCi/μmol(1μCi=2.2×106计数/min)。温育10min后,经三氯乙酸沉淀,用对3H效率为60%的液闪计数器测得放射性强度为692 521计数/min。
第7题
一般HTML文件用()来标记文件的开始和结果。
A.<head></head>
B.<html></html>
C.<title></title>
D.<body></body>
第8题
下述精巧的方法曾用来构建不同酶的DNA分子的限制酶图谱。首先,利用多核苷酸酶将噬菌体DNA的5'-末端标记上32P。样品分成两半,每份用酶Ⅰ或酶Ⅱ酶解。两份酶解物分别进行电泳,记下放射性带。这个实验鉴定出末端片段,提供的信息后面有用。该技术的要点是同时利用未标记的和均一标记的DNA样品。未标记样品用酶Ⅰ酶解,进行电泳时采取措施使条带较宽。用标准的溴化乙锭荧光技术定位这些条带,记录它们的位置,将凝胶浸在碱性溶液中使DNA变性,然后将条带转移到硝酸纤维素膜上,得到图16-3-13所示的谱型。32P标记的样品用酶Ⅱ处理、电泳、记录条带位置,将DNA碱变性,然后转移到含酶Ⅰ片段的硝酸纤维素膜上。转移时使弛P条带与未标记的条带成正交,如图6-3-13所示。然后将膜置于复性条件,洗涤,用放射自显影定位放射性。图16-3-13显示每条胶中条带位置(细线)和放射性位置(小圆点)。标有星号的条带是末端片段。试画出每种酶的限制酶图谱。数字表示每个片段的长度(kb),实心圈表示放射性区域。
第11题
Alfred D.Hershey和Martha Chase用P弛标记T2噬菌体的DNA,用S35标记的蛋白质外壳所进行的感染实验证实:DNA携带有T2的______。