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[主观题]

敏感型(ts)突变体是研究单倍体酵母细胞周期调控机理的重要手段,它使得能阻滞细胞周期进行的突变表型只在较

敏感型(ts)突变体是研究单倍体酵母细胞周期调控机理的重要手段,它使得能阻滞细胞周期进行的突变表型只在较高的培养温度(如35℃)才表现出来,而在较低的温度下(如20℃)则表现为野生型。某人筛选到两株ts突变体,在35℃时均表现为细胞增殖停止。为了解细胞周期阻滞的位置,他利用能将细胞阻滞在S期的药物羟基脲进行如下实验:

(1)把一部分培养在20℃的突变体A转移到35℃培养2小时以产生突变表型,而这也差不多是酵母细胞周期的长度。然后再把酵母转移到含羟基脲的培养液中在20℃培养,他在不同时间取样用显微镜观察,未见到细胞发生分裂。相比之下,一直培养在20℃的那些细胞在羟基脲中却能观察到一轮明显的细胞分裂。然后改变实验顺序,先把20℃培养的细胞用羟基脲处理2小时,再转移到不含该药物的培液中在35℃培养,这时能观察到一轮细胞分裂。

(2)用突变体B做相同的实验,则在两种情况下都看不到细胞分裂,而一直养在20℃的对照样品则能分裂。

问:①变体A和B在35℃会分别阻滞在细胞周期的什么位置?说明理由。②你能推测ts突变体对温度敏感的原因吗?

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第1题

一株具有经典交配系统的新的酵母,有两个单倍体交配型,分别称做M和F,棚互交配型的细胞能交配形成M/F二倍体细
胞。这些二倍体进行减数分裂并且形成孢子,但是它们可能彼此进行交配,也可能同单倍体交配型细胞进行交配。

对这个菌株进行遗传分析,发现有四个基因控制交配型。当基因M1和M2位于支配型基因座时,细胞的交配型为M1,当基因F1和F2位于支配型基因座时,细胞的交配型为F1。另外也证实了三套调控基因,一种专门表达于单倍体肘中(Msg),一种专门表达于单倍体F中(Fsg),一种存在于孢子中(Ssg)。获得可用的突变体,这些突变体在每个交配型基因上都有缺陷。它们对交配表型的影响,以及对特异性不同基因的表达的影响如表13-3-51所示。

表13-3-51 影响交配的酵母新菌株的表型

(Phenotypes of Mutants That Affect Mating in a New Strain of Yeast)
MutantMating

Phenotype

Geneg

Expressed

Haploid cellswild-type M

M1-

M2-

M1-,M2-

wild-type F

F1-

F2-

F1-,F2-

M

nonmatmg

M

nonmatmg

F

F

nonmat mg

nonmatmg

Msg

Msg,Fsg

Msg

Msg.Fsg

Fsg

Fsg

Fsg.Msg

Fsg.Msg

Diploid cellswild-type M/F

M1-/F1-

M1-/F2-

M2-/F1-

M2-/F2-

nonmatmg

F

nonmating

nonmating

M

Ssg

Fsg

Msg,Fsg,Ssg

none

Msg

(Msg=M专-的基因;Fsg=F专-的基因;Ssg=形成孢子专-基因)

请提出一种假设的调控机制来解释:M1M2F1F2的基因产物是如何控制M专一性基因,F专一性基因,及孢子专一性基因的表达的,并说明哪一个基因产物是转录激活物,哪一种产物是转录抑制物?基因产物是单独作用,还是协同作用?

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第2题

大肠杆菌菌株A有一个涉及复制起始的基因呈温度敏感突变[dna-(Ts)];这个菌株也是Lac-。当这种细菌涂布在琼脂

大肠杆菌菌株A有一个涉及复制起始的基因呈温度敏感突变[dna-(Ts)];这个菌株也是Lac-。当这种细菌涂布在琼脂培养基上,在42℃条件下不能形成菌落。菌株B是野生型,含有可传递的性因子F'lac。菌株A和B交配,并筛选到表型Lac+Dna-(Ts)的细胞(菌株C)。它们在42℃条件下也不能生长,以每代约0.8%频率分离Lac-Dna-(Ts)细胞。在42℃条件下,虽然由A培养物形成菌落的频率是10-6,而菌株C的温度抗性回复子的频率为10-4;这些存活细胞也失去了分离的Lac-细胞的特性。试解释菌株C可能是怎样形成的。菌株C含有dna-(Ts)等位基因吗?对于大肠杆菌dnaA或dnaE基因的突变体菌株,能出现这种现象吗?

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第3题

温度敏感突变的一种是冷敏感(Cs)突变,它在低于某特定温度下有突变表型,下表是几个必需基因的突变体(ess),“+

温度敏感突变的一种是冷敏感(Cs)突变,它在低于某特定温度下有突变表型,下表是几个必需基因的突变体(ess),“+”、“-”指形成菌落与不形成菌落。那么ess(Ts)、ess(Cs)双突变型的表型如何?

32℃ 37℃ 42℃

ess(Ts) + - -

ess(Cs) - - +

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第4题

对于芽殖酵母温度敏感突变体来说,在______条件下,可以正常分裂繁殖,而在______条件下,则不能正常分裂繁殖。
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第5题

生物膜主要由脂类和蛋白质组成。大肠杆菌细胞膜的于重约1/3是脂类,而且它们都是磷脂。一种研究膜磷脂的方法是
通过分离各种膜磷脂生物合成缺陷的突变体。试阐述一个过程以筛选大肠杆菌突变体,其细胞膜磷脂的合成是温度敏感的。用3-磷酸-L-甘油(GP)作为磷脂的前体。作为出发菌株,你得到的大肠杆菌菌株对GP的吸收是组成型的,但不能发酵GP,因为突变破坏了碱性磷酸酯酶和GP脱氢酶的活性。(提示:含大量放射性的细胞倘若贮藏几天或几周,随放射性衰变往往会死亡,可设法利用这一性质)
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第6题

大多数酵母菌株含有一种称之为______的质粒,它们是封闭环状的双链DNA分子,周长约6kb左右,以高拷贝数存在于
酵母细胞中,每个单倍体基因组含60~100个拷贝,约占酵母细胞总DNA的30%。
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第7题

大多数酵母菌株含有一种称之为________的质粒,它们是封闭环状的双链DNA分子,周长约6 kb,以高拷贝
数存在于酵母细胞中,每个单倍体基因组含60~100个拷贝,约占酵母细胞总DNA的30%。

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第8题

由酵母交配型基因座产生的关键调控蛋白之一是一个抑制蛋白,称做α2。在可交配型的单倍体细胞中,α2对于关闭一

由酵母交配型基因座产生的关键调控蛋白之一是一个抑制蛋白,称做α2。在可交配型的单倍体细胞中,α2对于关闭一系列涉及到交配型特异性的基因是必需的。在α2二倍体细胞中,α2抑制物同α1基因产物协同作用,关闭了除α特异性基因外的一系列单倍体特异性的基因。两类有区别又相互关联的保守DNA序列在这两套控制基因的上游被发现,一个在单倍体特异性基因前,另一个在α特异性基因前。根据这些上游序列的相关性,很有可能α2与两者都结合。然而,它的结合特性在它能识别单倍体特异性基因前必须通过α1蛋白以某种方式进行修饰。至此,这种修饰作用的本质是什么?α1是能催化α2的共价修饰,还是能与α2结合而修饰α2蛋白?

为了认清这些问题,要做三个实验。首先,在单独作用和共同作用两种方式下,测定α1和α2与两种上游调控DNA位点的结合(图13-3-50所示)。α1单独不能同含有任何调控位点的DNA片段结合。然而α2虽能与α专一性片段结合,但是不能同单倍体专一性片段结合。α1和α2的混合物同两者都能结合。

在第二个实验中,大量的含α专一性序列的未标记DNA加入到α1和α2蛋白的混合物中。在这样的条件下,单倍体专一性片段仍被束缚。同样,如果加入过量的含有单倍体专一性片段的未标记DNA到混合物中,α专一性片段仍然被束缚。

在第三个实验中,改变不同的α1和α2的比例,当α2过量时,同单倍体专一性片段的结合减弱,而当α1过量时,同α专一性片段的结合减弱。

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第9题

拟南芥油菜是通过()技术获得的。

A.单倍体育种

B.体细胞无性系

C.体细胞杂交

D.突变体筛选

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第10题

酵母之所以能够广泛用于研究高等真核生物遗传分析的模式生物,其原因是( )。

A.酵母既能作为单倍体又能作为二倍体生长,有利于遗传分析

B. 酵母的生命周期短,能够在较短的时期内分析很多代

C. 酵母与高等真核生物有相同的基因

D. A和B正确

E. ABC正确

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第11题

几年前,从紫外线强烈照射过的大肠杆菌群体中分离到突变体B/r。这种突变体与亲代菌株B相比较,它对紫外线有很
强的抗性。从存活细胞群体中分离到这种突变体并不足为奇,难以理解的是为什么在同样照射的培养物的存活细胞中,能够找得到像B/s那样对放射性高度敏感的菌株。试提出一种机理来解释后一种现象。你认为B/r和g/s的出发菌落是已经纯化了的还是含有亲代的野生型细胞?
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