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常用于DNA分离、纯化和鉴定的凝胶电泳有哪些，适用范围如何？
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第2题
因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列，将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中温育，这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成，如果不加GTP，只产生一定长度的RNA转录本，这个RNA转录本来自于合成的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现，则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。
为了验证你的想法，你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1)，另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及32P-CTP混合，除此之外，再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链，它就会终止转录)，通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。
第3题
由MNNG(亚硝基胍)引起的诱变损伤的本质以及它从DNA上被修复的机制可以用下面的实验来鉴定。为了确定诱变损伤的本质，未经处理的细菌和已用低剂量MNNG处理的细菌都在含50μg/ml的3H-MNNG的培养物中培养10min。分离它们的DNA并水解成核苷酸，然后经过纸层析分析放射性的嘌呤，结果如图Q12.2所示：
图Q12.2 层析法分离未被处理和已被低剂量MNNG处理的细菌DNA中被标记的甲基化嘌呤实线表示未被处理细菌DNA中的甲基化嘌呤；虚线表示MNNG处理的细菌所得结果
为了研究诱变损伤切除的机制，首先纯化负责切除的酶，把不同量的酶(相对分子质量19000)和已被3H标记含0.26pmol突变碱基的DNA一起温育，分析切除动力学。在不同时间取样，分析DNA以确定还存在多少突变残基(图Q12.3)。当在5℃而不是37℃时重复这个实验时，虽然最初的切除速率较慢，却得到一样的终点。
图Q12.3纯化的甲基转移酶把3H标记的甲基从DNA上切除所示为纯化酶的量
第8题
A.必须分离纯化出个体染色体。
B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离，这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。
C.必须进行单个染色体分析，这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。
D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。
E.必须先分离核DNA和细胞器DNA，然后用它们来分析个体的图谱。
第10题
用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火，用DNA连接酶处理，然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌落。从这些菌落中分离出质粒DNA，进行凝胶电泳，结果发现有两类菌落：一类菌落在原来质粒的预期位置处出现一条带；另一类菌落则得到一条移动慢得多的带。这条移动慢的带可能是何物？(用BglI酶处理Kan-rAmp-r质粒会破坏amp基因)
